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目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示.
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(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因,以便于
篩選(鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞)
篩選(鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞)

(2)pBR32Z分子中有單個(gè)EcoRI限制酶作用位點(diǎn),EcoR 1只能識別序列一GAATTC一,并只能在G與A之間切割.若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoRI的切點(diǎn),請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端.
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(3)pBR322分子中另有單個(gè)的BamHI限制酶作用位點(diǎn),現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因,通過DNA連接酶作用恢復(fù)鍵,成功的獲得了重組質(zhì)粒.說明
限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端
限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端

(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落.再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置).與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是
能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素
能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素
,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是
既能抗氨芐青霉素,又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒
既能抗氨芐青霉素,又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】篩選(鑒別目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞);菁優(yōu)網(wǎng);限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切產(chǎn)物具有相同末端;能抗氨芐青霉素,但不能抗四環(huán)素;既能抗氨芐青霉素,又能抗四環(huán)素的pBR322質(zhì)粒
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:17引用:5難度:0.5
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  • 1.紅細(xì)胞生成素(EPO)是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白,可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限,某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器,使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
  • 3.如表為5種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn),如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( ?。?
    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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