（一）苯酚呈酸性，是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。分離和固定化高效降解利用苯酚的細(xì)菌菌株可有效降解廢水中含有的苯酚。請(qǐng)回答下列問題：
（1）制備培養(yǎng)基時(shí)為獲取高效降解菌，培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入

一系列濃度梯度的苯酚

一系列濃度梯度的苯酚

作為唯一碳源。
（2）在無菌條件下，將土樣加到含有適量的

無菌水

無菌水

三角瓶中，振蕩搖勻，獲得

細(xì)菌懸液

細(xì)菌懸液

，并依次稀釋制備不同濃度的土壤稀釋液。采用

涂布分離

涂布分離

方法可以在培養(yǎng)基上獲得降解菌并計(jì)數(shù)。
（3）比較不同菌株降解苯酚能力的大小可采用的方法有：
①選擇苯酚含量相同的固體培養(yǎng)基，

降解圈大

降解圈大

的菌株降解能力強(qiáng)。
②用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一段時(shí)間后，可測(cè)定培養(yǎng)液的

酸性

酸性

進(jìn)行比較。
（4）工業(yè)上固定苯酚高效降解菌，與固定化酶比較，從操作角度考慮優(yōu)點(diǎn)有

更容易操作；對(duì)酶活性的影響更小

更容易操作；對(duì)酶活性的影響更小

，操作中往往不采用吸附法，而用包埋法的原因是

菌株較大，不易被吸附

菌株較大，不易被吸附

。
（二）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)，組織培養(yǎng)過程中易發(fā)生變異，特別是通過愈傷組織過程獲得的植株變異頻率更高?？茖W(xué)家利用這一點(diǎn)，對(duì)某一不具有抗鹽性的野生型植株進(jìn)行培養(yǎng)，通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可篩選獲得該植物的抗鹽突變體。
（1）相對(duì)于植物組織培養(yǎng)中的

分生組織發(fā)生

分生組織發(fā)生

途徑，通過愈傷組織產(chǎn)生的胚胎發(fā)生途徑和器官發(fā)生途徑形成的植株變異率高，更有利于突變體的篩選。
（2）為培育該抗鹽突變體，可將已消毒的外植體在合適的培養(yǎng)基中進(jìn)行

脫分化

脫分化

，產(chǎn)生肉眼可見的愈傷組織后將其放在搖床上，通過液體懸浮培養(yǎng)可分散成

胚性細(xì)胞

胚性細(xì)胞

，這種細(xì)胞的特點(diǎn)是

細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小二細(xì)胞核大

細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小二細(xì)胞核大

。
（3）將收集到的這種細(xì)胞在液體培養(yǎng)條件下，經(jīng)過培養(yǎng)基中成分的誘導(dǎo)，可發(fā)生類似

受精卵

受精卵

經(jīng)過卵裂、分化、器官發(fā)生和形態(tài)建成而發(fā)育成胚的過程。將形成的胚狀體進(jìn)一步轉(zhuǎn)移到加入

不同濃度的NaCl

不同濃度的NaCl

培養(yǎng)基中，可篩選出抗鹽突變體。
（4）植物細(xì)胞在長(zhǎng)期培養(yǎng)中，培養(yǎng)物的胚胎發(fā)生和器官形成能力會(huì)下降的原因可能有

染色體畸變、細(xì)胞核變異、非整倍體產(chǎn)生、激素平衡被打破、對(duì)外源物質(zhì)敏感性發(fā)生改變等

染色體畸變、細(xì)胞核變異、非整倍體產(chǎn)生、激素平衡被打破、對(duì)外源物質(zhì)敏感性發(fā)生改變等

。