如圖是將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞,培育轉(zhuǎn)基因動物的常用操作程序。根據(jù)圖示過程和所學(xué)知識,將下面操作程序補(bǔ)充完整。
(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體:在構(gòu)建基因表達(dá)載體時常要用到的工具酶是 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。如果目的基因要在乳腺細(xì)胞中表達(dá),基因表達(dá)載體構(gòu)建時要將目的基因與 乳腺蛋白基因乳腺蛋白基因的啟動子、標(biāo)記基因和終止子等組件重組在一起。
(2)獲得足夠數(shù)量的受精卵:為了獲得足夠數(shù)量的受精卵,先利用 促性腺激素促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵,然后從 輸卵管輸卵管沖取卵子,再完成體外受精。
(3)將目的基因?qū)爰?xì)胞:確定目的基因是否整合到染色體上,一般需用放射性同位素標(biāo)記的 目的基因(單鏈)目的基因(單鏈)做探針,與轉(zhuǎn)基因小鼠細(xì)胞中提取的 基因組DNA(核DNA)基因組DNA(核DNA)進(jìn)行DNA分子雜交。
(4)早期胚胎培養(yǎng):早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分一般比較復(fù)雜,除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外,還需要添加氨基酸、核苷酸、維生素、激素激素、等營養(yǎng)成分以及動物血清等物質(zhì)。當(dāng)胚胎培養(yǎng)到適宜的階段時,可進(jìn)行胚胎移植。
(5)胚胎移植:在胚胎移植前要對接受胚胎的受體進(jìn)行同期發(fā)情處理。移植后,還要對受體雌鼠進(jìn)行 妊娠妊娠檢查。
【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植;基因表達(dá)載體的構(gòu)建.
【答案】限制酶、DNA連接酶;乳腺蛋白基因;促性腺激素;輸卵管;目的基因(單鏈);基因組DNA(核DNA);激素;妊娠
【解答】
【點(diǎn)評】
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