亨廷頓舞蹈?。℉D）是由單基因（HTT）突變導致的神經(jīng)退行性疾病，患者表現(xiàn)為行為遲緩或運動障礙。研究人員利用CRISPR/Cas9基因編輯技術構建HD模型小鼠，為制備其它神經(jīng)退行性疾病的動物模型提供了參考。
（1）CRISPR/Cas9系統(tǒng)的工作原理如圖1所示：
CRISPR/Cas9系統(tǒng)是由具有切割雙鏈DNA切割雙鏈DNA活性的Cas9-D10A和成對的具有向導作用的gRNA1和gRNA2構成。gRNA1和gRNA2通過堿基互補配對堿基互補配對原則特異性結合到目的基因特定的單鏈DNA片段；然后由Cas9-D10A識別并切斷兩個結合位點附近單鏈DNA中的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵鍵，進而產(chǎn)生兩個缺口；再通過一定的基因重組方法將外源DNA片段在缺口處進行整合實現(xiàn)原位敲入，即外源DNA片段替換某基因的片段。
（2）圖2為150Q模型小鼠構建原理，科研人員以HIT基因所在的DNA鏈HIT基因所在的DNA鏈為模板，在其外顯子1附近設計gRNA靶點序列，并構建包含gRNA基因、Cas9基因和150Q150Q的重組表達載體。
（3）為培育出純合150Q模型小鼠，科研人員進行了如下操作：
①150Q模型小鼠F0代構建：將構建好的重組表達載體導入小鼠受精卵中，體外培養(yǎng)一段時間后，通過胚胎移植胚胎移植技術轉移到若干雌性小鼠子宮中，適宜條件培養(yǎng)。25天后，通過HCGHCG技術鑒定得到轉入成功的F0代小鼠6只。
②150Q模型小鼠F1、F2、F3代構建：待F0代小鼠性成熟后，與健康的野生型小鼠進行交配培育F1代小鼠，經(jīng)鑒定后，挑選其中的150Q模型小鼠與健康的野生型小鼠交配，培育出F2代小鼠，使其中的150Q模型小鼠之間進行相互交配，培育出F3代小鼠。部分F3代小鼠基因型鑒定結果如圖3所示：
請據(jù)圖判斷，科研人員是否培育出純合150Q模型小鼠，并寫出判斷依據(jù)。
（4）有人認為成功導入150Q的小鼠即可直接用做HD小鼠模型進行相關研究，你是否同意該觀點？若不同意，請說出需要進一步通過哪些方法來判斷其是否可作為模型小鼠。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】切割雙鏈DNA；堿基互補配對；磷酸二酯鍵；HIT基因所在的DNA鏈；150Q；胚胎移植；HCG
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：25引用：2難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
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（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
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