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亨廷頓舞蹈?。℉D)是由單基因(HTT)突變導(dǎo)致的神經(jīng)退行性疾病,患者表現(xiàn)為行為遲緩或運動障礙。研究人員利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)構(gòu)建HD模型小鼠,為制備其它神經(jīng)退行性疾病的動物模型提供了參考。
(1)CRISPR/Cas9系統(tǒng)的工作原理如圖1所示:
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CRISPR/Cas9系統(tǒng)是由具有
切割雙鏈DNA
切割雙鏈DNA
活性的Cas9-D10A和成對的具有向?qū)ё饔玫膅RNA1和gRNA2構(gòu)成。gRNA1和gRNA2通過
堿基互補配對
堿基互補配對
原則特異性結(jié)合到目的基因特定的單鏈DNA片段;然后由Cas9-D10A識別并切斷兩個結(jié)合位點附近單鏈DNA中的
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
鍵,進而產(chǎn)生兩個缺口;再通過一定的基因重組方法將外源DNA片段在缺口處進行整合實現(xiàn)原位敲入,即外源DNA片段替換某基因的片段。
(2)圖2為150Q模型小鼠構(gòu)建原理,科研人員以
HIT基因所在的DNA鏈
HIT基因所在的DNA鏈
為模板,在其外顯子1附近設(shè)計gRNA靶點序列,并構(gòu)建包含gRNA基因、Cas9基因和
150Q
150Q
的重組表達載體。
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(3)為培育出純合150Q模型小鼠,科研人員進行了如下操作:
①150Q模型小鼠F0代構(gòu)建:將構(gòu)建好的重組表達載體導(dǎo)入小鼠受精卵中,體外培養(yǎng)一段時間后,通過
胚胎移植
胚胎移植
技術(shù)轉(zhuǎn)移到若干雌性小鼠子宮中,適宜條件培養(yǎng)。25天后,通過
HCG
HCG
技術(shù)鑒定得到轉(zhuǎn)入成功的F0代小鼠6只。
②150Q模型小鼠F1、F2、F3代構(gòu)建:待F0代小鼠性成熟后,與健康的野生型小鼠進行交配培育F1代小鼠,經(jīng)鑒定后,挑選其中的150Q模型小鼠與健康的野生型小鼠交配,培育出F2代小鼠,使其中的150Q模型小鼠之間進行相互交配,培育出F3代小鼠。部分F3代小鼠基因型鑒定結(jié)果如圖3所示:
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請據(jù)圖判斷,科研人員是否培育出純合150Q模型小鼠,并寫出判斷依據(jù)。
(4)有人認為成功導(dǎo)入150Q的小鼠即可直接用做HD小鼠模型進行相關(guān)研究,你是否同意該觀點?若不同意,請說出需要進一步通過哪些方法來判斷其是否可作為模型小鼠。

【答案】切割雙鏈DNA;堿基互補配對;磷酸二酯鍵;HIT基因所在的DNA鏈;150Q;胚胎移植;HCG
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:25引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.目前,科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關(guān)的說法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展.
    (1)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結(jié)合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
    、
     
    、
     
    等,而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進行篩選.進行基因轉(zhuǎn)移時,通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時,應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細胞中特異性表達.
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     

    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細胞內(nèi),通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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