Cre酶是一種重組酶，LoxP是能被Cre酶識(shí)別的特異DNA序列，當(dāng)一條DNA鏈上存在兩個(gè)相同的LoxP序列且方向相同時(shí)，Cre酶能有效切除兩個(gè)位點(diǎn)間的DNA序列（如圖1）。因此Cre/LoxP重組酶系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特異位點(diǎn)的基因敲除、基因插入等操作。
（1）啟動(dòng)子的功能是

驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

；Cre酶與限制酶的功能類似，能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的

磷酸二酯鍵

磷酸二酯鍵

斷開。
（2）據(jù)上圖分析，若細(xì)胞中不含有Cre酶，轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列就會(huì)抑制下游GFP基因起作用，細(xì)胞無法發(fā)出熒光；若細(xì)胞中含有Cre酶，Cre酶會(huì)切除

轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列和LoxP

轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列和LoxP

，GFP基因就會(huì)

表達(dá)

表達(dá)

，合成綠色熒光蛋白。
（3）當(dāng)細(xì)胞中存在多對(duì)Cre酶識(shí)別位點(diǎn)和熒光基因時(shí)，只有在啟動(dòng)子之后且與啟動(dòng)子相鄰的熒光蛋白基因才會(huì)表達(dá)，借助大腦成像技術(shù)，通過熒光蛋白“點(diǎn)亮”大腦內(nèi)的神經(jīng)元，試驗(yàn)小鼠不同的腦組織細(xì)胞就會(huì)呈現(xiàn)不同的顏色，出現(xiàn)“腦彩虹”。
①若利用PCR技術(shù)擴(kuò)增LoxP基因，需要的引物有

B、C

B、C

（從圖2中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇）。PCR反應(yīng)完成后，常采用

瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳

來鑒定PCR的產(chǎn)物。
②研究者利用限制酶和

DNA連接酶

DNA連接酶

酶構(gòu)建了含有熒光蛋白基因和Cre酶識(shí)別序列的基因表達(dá)載體（圖3），并將其導(dǎo)入小鼠細(xì)胞中，培育出了轉(zhuǎn)基因小鼠。若該小鼠腦細(xì)胞中存在Cre酶且僅識(shí)別LoxP2時(shí)，腦細(xì)胞的色彩為

黃色和藍(lán)色

黃色和藍(lán)色

。