Ⅰ．鹽分是限制植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要因素之一，科研人員嘗試?yán)免┮号菽a⁺/K⁺逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因（AINHX基因）培育轉(zhuǎn)基因耐鹽馬鈴薯。
（1）通常從獐茅的

基因文庫(kù)

基因文庫(kù)

中獲取AINHX基因用以構(gòu)建基因表達(dá)載體，構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中必須使用的工具酶是

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

。
（2）為探究目的基因整合到馬鈴薯基因組后是否轉(zhuǎn)錄，可從轉(zhuǎn)基因植株的細(xì)胞中提取所有mRNA并反轉(zhuǎn)錄成

cDNA

cDNA

，再利用PCR方法進(jìn)行基因擴(kuò)增。若以根細(xì)胞為材料擴(kuò)增結(jié)果為陽(yáng)性（有產(chǎn)物生成），以葉細(xì)胞為材料擴(kuò)增結(jié)果為陰性（無產(chǎn)物生成），則說明

目的基因在根細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，未在葉細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄

目的基因在根細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄，未在葉細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄

。
（3）為證明轉(zhuǎn)基因馬鈴薯獲得了耐鹽性，將

生長(zhǎng)至4葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度NaCl的培養(yǎng)液中或大田中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察植株生長(zhǎng)情況

生長(zhǎng)至4葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度NaCl的培養(yǎng)液中或大田中培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察植株生長(zhǎng)情況

。
Ⅱ．馬鈴薯是種植廣泛的農(nóng)作物，病毒侵染后導(dǎo)致產(chǎn)量大幅下降，培育脫毒和抗毒的馬鈴薯品種是提高產(chǎn)量的有效方法。請(qǐng)分析并回答問題：

（4）馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒，因此可將馬鈴薯莖尖接種在培養(yǎng)基中，經(jīng)過人工培養(yǎng)獲得脫毒苗。為監(jiān)控脫毒苗的質(zhì)量，可采用

抗原—抗體雜交

抗原—抗體雜交

的方法檢測(cè)病毒的蛋白質(zhì)。
（5）研究人員研究了莖尖外植體大小對(duì)苗的成苗率和脫毒率的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如上圖所示。該結(jié)果表明，在一定范圍內(nèi)，莖尖越小，

成苗率越低，脫毒率越高

成苗率越低，脫毒率越高

，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為

0.27mm

0.27mm

。