動物細胞的培養(yǎng)傳代比較困難,為長期保存動物的基因組,一般利用大腸桿菌構建基因組文庫,具體流程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)一種生物的基因組文庫含有該種生物
全部
全部
(填“部分”或“全部”)的基因。為保證載體和基因組DNA片段能夠連接,載體要先用
EcoRⅠ
EcoRⅠ
(酶)處理。將基因組DNA導入大腸桿菌菌群前,大腸桿菌需要提前用
Ca2+
Ca2+
處理,使其處于感受態(tài)。
(2)研究者需要從基因組文庫中獲取動物細胞的Y基因進行實驗。利用PCR技術擴增DNA時,需要在反應體系中添加的有機物質有
引物、模板DNA、Taq酶
引物、模板DNA、Taq酶
和4種脫氧核苷酸,該技術依據的生物學原理是
DNA復制
DNA復制
。
(3)甲鏈為Y基因的轉錄模板鏈,乙鏈為甲鏈的互補鏈。轉化之后,為了判斷Y基因是否進入受體細胞,可以用
標記的Y基因的甲(或乙)
標記的Y基因的甲(或乙)
鏈片段作為探針;為判斷目的基因是否成功轉錄,可以用
標記的Y基因的甲
標記的Y基因的甲
鏈片段作為探針。