幽門螺桿菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，該菌的Ipp20基因能合成其特有的蛋白質(zhì)，據(jù)此，研究者利用基因工程制備Hp疫苗。已知Ipp20基因表達(dá)時(shí)，雙鏈DNA的一條鏈?zhǔn)蔷幋a鏈，另一條鏈?zhǔn)悄０彐湥鐖D1；四種限制酶及其識(shí)別序列如圖2；三種質(zhì)粒如圖3，箭頭表示限制酶的切割位點(diǎn)；操作步驟如圖4?；卮鹣铝袉栴}：
（1）Ipp20基因終止子序列位于圖1中的 非編碼區(qū)2非編碼區(qū)2區(qū)段，該基因轉(zhuǎn)錄時(shí)，編碼起始密碼子的序列位于圖1中的 編碼區(qū)編碼區(qū)區(qū)段。
（2）轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA前8個(gè)堿基序列為 5′CUCGAGAU5′CUCGAGAU（方向?yàn)?′→3′）。若通過PCR技術(shù)大量擴(kuò)增Ipp20基因的編碼區(qū)段，則需要設(shè)計(jì)一對(duì)引物，其中結(jié)合到編碼鏈上的引物序列是 5′TCTAGAGG5′TCTAGAGG（方向?yàn)?′→3′，寫出5′端8個(gè)堿基序列）。
（3）據(jù)圖1、2、3分析，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用的限制酶是 XbaⅠ、XhoⅠXbaⅠ、XhoⅠ，最適合用作載體的質(zhì)粒是 質(zhì)粒Z質(zhì)粒Z。
（4）圖4中為篩選出含有目的基因的大腸桿菌，通常采用影印法（使用無菌的線氈布?jí)涸谂囵B(yǎng)基A的菌落上，帶出少許菌種，平移并壓在培養(yǎng)基B上、結(jié)果如圖所示）。培養(yǎng)基A、B中應(yīng)分別添加 潮霉素、氯霉素潮霉素、氯霉素，符合實(shí)驗(yàn)要求的菌落是 3、53、5（填寫數(shù)字），判斷依據(jù)是 菌落3、5在含潮霉素培養(yǎng)基中能生長，但在含氯霉素培養(yǎng)基中不能生長，說明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質(zhì)粒菌落3、5在含潮霉素培養(yǎng)基中能生長，但在含氯霉素培養(yǎng)基中不能生長，說明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質(zhì)粒。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】非編碼區(qū)2；編碼區(qū)；5′CUCGAGAU；5′TCTAGAGG；XbaⅠ、XhoⅠ；質(zhì)粒Z；潮霉素、氯霉素；3、5；菌落3、5在含潮霉素培養(yǎng)基中能生長，但在含氯霉素培養(yǎng)基中不能生長，說明含有因插入目的基因而丟失氯霉素抗性基因的重組質(zhì)粒
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：27引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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