11.芽孢桿菌生長迅速,營養(yǎng)要求簡單,且能形成抗逆性很強的芽孢。某實驗小組欲以黃瓜灰霉病菌作為指示菌,從采集到的土樣中分離芽孢桿菌,并從分離到的芽孢桿菌中篩選高效廣譜拮抗菌(指一種菌能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制另外一種菌的生存),其所需培養(yǎng)基和實驗步驟如下?;卮鹣铝袉栴}:
(一)培養(yǎng)基
PB培養(yǎng)基:用于病原細(xì)菌的培養(yǎng)和病原細(xì)菌拮抗菌的培養(yǎng)、篩選及保存。
PDA培養(yǎng)基:用于病原真菌的培養(yǎng)和病原真菌拮抗菌的篩選。
(二)實驗步驟
(1)芽孢桿菌的分離和純化
準(zhǔn)確稱取10g土壤樣品,加入到盛有90 mL的無菌水中,振蕩靜止后再用
吸取10mL土壤懸液加到90 mL無菌水中,充分混勻,即得
倍稀釋液,然后以此類推逐步梯度稀釋至適當(dāng)濃度,取合適稀釋度下的菌液,涂布接種于
固體培養(yǎng)基上。根據(jù)菌落的
(答三個)等特征,挑取不同形態(tài)的單菌落,作為待測原始菌株。
(2)拮抗菌的初篩--五點對峙法
在PDA平板中心接種黃瓜灰霉病菌菌餅,四周等距離接種待篩選芽孢桿菌,25℃恒溫培養(yǎng),每個篩選實驗重復(fù)3次,目的是
。根據(jù)
比較拮抗能力,從而保留拮抗效果優(yōu)良的菌株。
(3)探究培養(yǎng)時間對抗菌物質(zhì)的影響
實驗小組通過篩選找出了優(yōu)良的芽孢桿菌菌株ch-22,現(xiàn)欲探究培養(yǎng)時間對其產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)活性的影響,請簡要寫出實驗思路:
。