25．野生型甜玉米與普通玉米相比，可溶性糖向淀粉的轉(zhuǎn)化較慢導致可溶性糖含量高，汁多質(zhì)脆，富含多種維生素。為提高甜玉米的生產(chǎn)應用價值，科研人員培育出了超量表達G蛋白轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達G基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖1、2所示。
（1）強啟動子能被
識別并結(jié)合，驅(qū)動基因持續(xù)轉(zhuǎn)錄。T-DNA在培育轉(zhuǎn)基因甜玉米中的作用是
。為使DNA片段能定向插入T-DNA中，可用PCR技術(shù)在DNA片段的兩端添加限制酶識別序列，M、N端添加的序列所對應的限制酶分別是
。處理好的DNA片段與Ti質(zhì)粒的重組過程共需要
種酶。
（2）外植體經(jīng)脫分化形成的愈傷組織放入農(nóng)桿菌液浸泡后進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入
進行篩選，獲得玉米株系a
1、a
2、a
3、a
4。通過對四個株系的G蛋白表達量進行測定，發(fā)現(xiàn)a
4株系的表達量與野生型相近，原因可能是
。
（3）真核基因的編碼區(qū)含有內(nèi)含子和外顯子。圖3為淀粉酶合成基因片段，其轉(zhuǎn)錄后形成的前體RNA需通過剪接（切去內(nèi)含子對應序列）和加工后方能用于翻譯。科研人員希望通過降低淀粉酶合成基因的表達，進一步提高甜玉米中可溶性糖的含量，將嗎啉反義寡核苷酸（RNA剪接抑制劑）導入玉米受精卵中，發(fā)現(xiàn)其基因表達受阻?？蒲腥藛T對它的具體作用提出兩種假說。
假說1：導致RNA前體上內(nèi)含子1的對應序列不能被剪切；
假說2：導致RNA前體上外顯子2的對應序列被剪切。
①為驗證上述假說，分別從受精卵發(fā)育后3天的實驗組和對照組胚細胞中提取
，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。若假說1成立，使用圖示引物2和引物4進行PCR后電泳的結(jié)果為
（填字母）。
A.實驗組有目的條帶
B.實驗組無目的條帶
C.對照組有目的條帶
D.對照組無目的條帶
②若要證明假說2，需選擇圖示引物
進行PCR。
