24.某研究團(tuán)隊(duì)從沙漠野生檉柳中克隆出了一個(gè)耐鹽堿基因TcSR1。該團(tuán)隊(duì)用限制酶BalⅡ切割目的基因TcSR1,用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒載體V3,兩種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)如圖所示,經(jīng)過(guò)體外重組和轉(zhuǎn)化,最終獲得了能夠在鹽堿地生長(zhǎng)的楊樹(shù)新品種?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)使用
技術(shù)在體外擴(kuò)增耐鹽堿基因TcSR1,擴(kuò)增時(shí)需要
種引物。基因TcSR1不直接導(dǎo)入楊樹(shù)細(xì)胞,原因是
(答出兩點(diǎn)即可)。
(2)用限制酶BalⅡ切割目的基因和用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒載體V3后,再用
酶處理,以構(gòu)建基因表達(dá)載體,該表達(dá)載體不能夠被BalⅡ或BamHⅠ識(shí)別并切割,原因是
。
(3)將目的基因?qū)霔顦?shù)細(xì)胞,培育后篩選轉(zhuǎn)化陽(yáng)性的植株。若要檢測(cè)楊樹(shù)植株中目的基因TcSR1是否發(fā)生轉(zhuǎn)錄,可采用
技術(shù),需要將
片段制成探針,通過(guò)檢測(cè)放射性達(dá)到目的。
(4)為進(jìn)一步研究轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)的耐鹽堿機(jī)制,還需要進(jìn)一步開(kāi)展研究,實(shí)驗(yàn)思路是通過(guò)
技術(shù)獲得大量轉(zhuǎn)基因植物,然后
。