25.《本草綱目》記載,“蟬花可治療驚癇,夜啼心悸,功同蟬蛻”。蟬花是蟬擬青霉寄生于蟬若蟲后形成的蟲菌復(fù)合體,內(nèi)含蟲草多糖、甘露醇及必需氨基酸等成分。為提高產(chǎn)量,研究人員擬從天然蟬花中分離純化蟬擬青霉菌株進(jìn)行人工培養(yǎng)。請回答問題。
(1)制備培養(yǎng)基:
①該實(shí)驗(yàn)選擇馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基,配方如下:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,KH
2PO
42g,MgSO
40.5g,瓊脂20g,用蒸餾水定容至1000mL,自然pH。該培養(yǎng)基中的馬鈴薯可為微生物生長提供
等營養(yǎng)成分(至少寫出2種),自然 pH為
性范圍。
②從培養(yǎng)菌種的角度分析,PDA培養(yǎng)基與牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的主要區(qū)別是
。
③為了便于篩選蟬擬青霉菌株,培養(yǎng)基中還應(yīng)加入青霉素以抑制
的生長;按培養(yǎng)基功能劃分,該培養(yǎng)基屬于
培養(yǎng)基。
(2)蟬花真菌的分離、純化:
①取新鮮蟬花,用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精進(jìn)行
,取蟲體胸腔中的少許菌絲切成1mm左右長,接種至PDA培養(yǎng)基,然后置于25℃的
中培養(yǎng)3~5d,形成菌落。
②待菌落直徑長至0.2~0.5cm時(shí)挑選少量菌絲,采用
法接種至 PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行純化,純化2~4次,確定無雜菌后,可采用甘油管藏的方法進(jìn)行
。
(3)發(fā)酵生產(chǎn):檢測蟬花真菌發(fā)酵所用的液體培養(yǎng)基是否徹底滅菌,常用方法是
。