有研究表明CDKN2B基因與人的壽命有關(guān),科學(xué)家將該基因?qū)胄∈笫芫褍?nèi),統(tǒng)計(jì)其壽命是否高于正常小鼠,圖1表示CDKN2B基因與相關(guān)限制酶切割位點(diǎn),該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同(T、U視為相同的堿基),圖2為質(zhì)粒結(jié)構(gòu)的簡(jiǎn)圖,回答下列有關(guān)問題:
(1)科學(xué)家首先采用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。若一個(gè)CDKN2B基因在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán),需要消耗 3030個(gè)引物。
(2)科學(xué)家在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中,單獨(dú)使用限制酶HindⅢ加分別切割目的基因和載體后產(chǎn)生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)約一半的細(xì)胞中沒有檢測(cè)到CDKN2B蛋白,原因是 部分基因反向連接部分基因反向連接。為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生,請(qǐng)?zhí)岢龈倪M(jìn)措施:同時(shí)用PstⅠ、EcoRⅠ分別對(duì)目的基因和載體進(jìn)行酶切同時(shí)用PstⅠ、EcoRⅠ分別對(duì)目的基因和載體進(jìn)行酶切。
使用改進(jìn)后的方法構(gòu)建重組質(zhì)粒后,篩選時(shí)在培養(yǎng)基中添加的抗生素為 四環(huán)素四環(huán)素。
(3)若想讓一個(gè)轉(zhuǎn)入了目的基因的受精卵發(fā)育成多個(gè)個(gè)體,可用 胚胎分割胚胎分割技術(shù),在操作時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚期的胚胎,分割時(shí)還應(yīng)注意做到 將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。
【考點(diǎn)】胚胎分割技術(shù).
【答案】30;部分基因反向連接;同時(shí)用PstⅠ、EcoRⅠ分別對(duì)目的基因和載體進(jìn)行酶切;四環(huán)素;胚胎分割;桑葚胚或囊胚;將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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