我國(guó)一科研團(tuán)隊(duì)將荒漠植物TaNHX2基因轉(zhuǎn)移到普那菊萵苣細(xì)胞內(nèi),獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽普那菊萵苣新品種?;卮鹣铝杏嘘P(guān)問(wèn)題:
(1)為保證目的基因在普那菊萵苣細(xì)胞中能夠表達(dá),運(yùn)載體上應(yīng)含有特定的 啟動(dòng)子啟動(dòng)子(復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、標(biāo)記基因)
(2)將普那菊萵苣幼胚接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,經(jīng)過(guò) 脫分化脫分化過(guò)程,培養(yǎng)出愈傷組織,然后用 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法法,將目的基因和相關(guān)功能片段整合到愈傷組織細(xì)胞的染色體DNA上。
(3)為驗(yàn)證外源基因整合到普那菊萵苣基因組后是否轉(zhuǎn)錄,可從轉(zhuǎn)基因植株的細(xì)胞中提取所用mRNA并反轉(zhuǎn)錄成 cDNA(互補(bǔ)DNA)cDNA(互補(bǔ)DNA),再以反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板,利用TaNHX2基因特異性引物,通過(guò) PCRPCR方法進(jìn)行基因擴(kuò)增。若以根細(xì)胞為材料擴(kuò)增結(jié)果為陽(yáng)性(有產(chǎn)物生成),以葉細(xì)胞為材料擴(kuò)增結(jié)果為陰性(無(wú)產(chǎn)物生成),則說(shuō)明 目的基因(TaNHX2基因)僅在根細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄,未在葉細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄目的基因(TaNHX2基因)僅在根細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄,未在葉細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄。
(4)將生長(zhǎng)至4葉期的轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)入高濃度的NaCl溶液中培養(yǎng),進(jìn)行耐鹽試驗(yàn),用非轉(zhuǎn)基因幼苗作為對(duì)照。培養(yǎng)30天后觀察現(xiàn)象,若 轉(zhuǎn)基因幼苗的存活率高于非轉(zhuǎn)基因幼苗轉(zhuǎn)基因幼苗的存活率高于非轉(zhuǎn)基因幼苗則說(shuō)明轉(zhuǎn)基因植株獲得了耐鹽特性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】啟動(dòng)子;脫分化;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;cDNA(互補(bǔ)DNA);PCR;目的基因(TaNHX2基因)僅在根細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄,未在葉細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄;轉(zhuǎn)基因幼苗的存活率高于非轉(zhuǎn)基因幼苗
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:30引用:11難度:0.3
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