大芻草具有較強(qiáng)的耐鹽堿能力，該性狀與M蛋白有關(guān)。科學(xué)家通過PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增M蛋白基因（如圖1）。將獲得的大量M蛋白基因與質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，各部分結(jié)構(gòu)如圖2所示。
（1）PCR一般可分為變性、復(fù)性、延伸變性、復(fù)性、延伸三步。據(jù)圖1分析，PCR過程應(yīng)選擇的引物是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ，引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。
（2）在M蛋白基因兩端設(shè)計(jì)不同黏性末端的目的是 防止M蛋白基因自身環(huán)化，保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接防止M蛋白基因自身環(huán)化，保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接。質(zhì)粒中氨芐青霉素抗性基因的作用是 便于重組DNA分子的篩選便于重組DNA分子的篩選。
（3）為實(shí)現(xiàn)質(zhì)粒和M蛋白基因的高效連接，切割質(zhì)粒時(shí)選用限制酶XmaⅠ而不選用限制酶SmaⅠ的原因是 XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端為平末端，無法與M蛋白基因的黏性末端連接XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端為平末端，無法與M蛋白基因的黏性末端連接。為將M蛋白基因連接到質(zhì)粒上，還需要等酶 BglⅡ、DNA連接酶BglⅡ、DNA連接酶。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】變性、復(fù)性、延伸；Ⅱ、Ⅲ；使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸；防止M蛋白基因自身環(huán)化，保證M蛋白基因在質(zhì)粒上正向連接；便于重組DNA分子的篩選；XmaⅠ酶切出的黏性末端與M蛋白基因黏性末端相同，SmaⅠ的酶切末端為平末端，無法與M蛋白基因的黏性末端連接；BglⅡ、DNA連接酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.4
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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