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如圖所示為質(zhì)粒B和一個(gè)含目的基因的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因,lacZ為藍(lán)色顯色基因(能使含該基因的大腸桿菌菌落呈藍(lán)色)。圖中EcoRⅠ、PvuⅠ為兩種限制酶,括號(hào)內(nèi)的數(shù)字表示限制酶切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離。請(qǐng)據(jù)圖分析并回答問(wèn)題:

(1)外源基因在受體細(xì)胞中能啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵是載體上具有
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識(shí)別和結(jié)合的部位。
(2)將用限制酶
PvuⅠ
PvuⅠ
切開(kāi)的質(zhì)粒B溶液與目的基因溶液混合,加入DNA連接酶連接后,導(dǎo)入大腸桿菌。為了便于篩選,作為受體細(xì)胞的大腸桿菌自身
不含
不含
(含/不含)lacZ基因和
沒(méi)有
沒(méi)有
(有/沒(méi)有)氨芐青霉素抗性。導(dǎo)入后應(yīng)從
大腸桿菌菌落的顏色和是否抗氨芐青霉素
大腸桿菌菌落的顏色和是否抗氨芐青霉素
兩個(gè)角度對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行篩選。
(3)將獲得的重組質(zhì)粒用EcoRⅠ完全酶切并進(jìn)行電泳觀察,若出現(xiàn)長(zhǎng)度為3.1kb和
3.6
3.6
kb的片段,則載體和目的基因反向連接。若出現(xiàn)長(zhǎng)度為
1.1
1.1
kb 和
5.6
5.6
kb的片段,則載體和目的基因正向連接。(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點(diǎn)與EcoRⅠ的識(shí)別位點(diǎn)之間的堿基對(duì)忽略不計(jì))

【答案】RNA聚合酶;PvuⅠ;不含;沒(méi)有;大腸桿菌菌落的顏色和是否抗氨芐青霉素;3.6;1.1;5.6
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:19引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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