變胖過程中，胰島B細胞會增加。增加的B細胞可能源于自身分裂（途徑Ⅰ），也可能來自胰島中干細胞的增殖、分化（途徑Ⅱ）?？茖W家采用胸腺嘧啶類似物標記的方法，研究了L基因缺失導致肥胖的模型小鼠IK中新增B細胞的來源。
（1）EdU和BrdU都是胸腺嘧啶類似物，能很快進入細胞并摻入正在復制的DNA中，摻入DNA的EdU和BrdU均能與 AA（用字母表示）互補配對，并可以被分別檢測，未摻入的EdU和BrdU短時間內(nèi)即被降解。
（2）將處于細胞周期不同階段的細胞混合培養(yǎng)于多孔培養(yǎng)板中，各孔同時加入EdU，隨后每隔一定時間向一組培養(yǎng)孔加入BrdU，再培養(yǎng)十幾分鐘后收集該組孔內(nèi)全部細胞，檢測雙標記細胞占EdU標記細胞的百分比（如圖），圖中反映DNA復制所需時長的是從 QQ點到 RR點。
（3）為研究變胖過程中B細胞的增殖，需使用一批同時變胖的小鼠。為此，本實驗使用誘導型基因敲除小鼠，即飼喂誘導物后小鼠的L基因才會被敲除，形成小鼠IK，科學家利用以下實驗材料制備小鼠IK：
①純合小鼠Lx：小鼠L基因兩側(cè)已插入特異DNA序列（x），但L的功能正常；
②Ce酶基因：源自噬菌體，其編碼的酶進入細胞核后作用于x,導致兩個x間的DNA片段丟失；
③Er基因：編碼的Er蛋白位于細胞質(zhì)，與Er蛋白相連的物質(zhì)的定位由Er蛋白決定；
④口服藥T：小分子化合物，可誘導Er蛋白進入細胞核。
請完善制備小鼠IK的技術(shù)路線：將Ce酶基因和Er基因連接將Ce酶基因和Er基因連接→連接到表達載體→轉(zhuǎn)入小鼠Lx→篩選目標小鼠→飼喂口服藥T飼喂口服藥T→獲得小鼠IK。
（4）各種細胞DNA復制所需時間基本相同，但途徑Ⅰ的細胞周期時長（t1）是途徑Ⅱ細胞周期時長（t2）的三倍以上。據(jù)此，科學家先用EdU飼喂小鼠IK，t2時間后換用BrdU飼喂，再過t2時間后檢測B細胞被標記的情況。研究表明，變胖過程中增加的B細胞大多數(shù)來源于自身分裂，與之相應的檢測結(jié)果應是 大多數(shù)B細胞沒有被BrdU標記大多數(shù)B細胞沒有被BrdU標記。
【答案】A；Q；R；將Ce酶基因和Er基因連接；飼喂口服藥T；大多數(shù)B細胞沒有被BrdU標記
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/18 8:0:8組卷：156引用：1難度：0.6
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1．動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項技術(shù)的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動物克隆和胚胎工程有關(guān)的問題：
（1）幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。在進行基因工程操作時，可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動物成纖維細胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以支持生長等措施。當?shù)谝粋€卡氏瓶中的細胞濃度不再增加時，若要細胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯誤的是
A．在動物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
B．若在囊胚期進行胚胎分割，內(nèi)細胞團均等分割，滋養(yǎng)成則不必
C．可以從雌性動物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細胞進一步培養(yǎng)成熟
D．胚胎成纖維細胞可以用于胚胎干細胞的培養(yǎng)，因為其能分泌抑制細胞分化的物質(zhì)。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7 -
3．據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù)，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請回答下列問題：
（1）從患者體內(nèi)獲得體細胞后，對其進行的初次培養(yǎng)稱為，培養(yǎng)的細胞在貼壁生長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂，這種現(xiàn)象稱為。一般來說，動物細胞培養(yǎng)需要的條件有（少答出兩點）。
（2）利用PCR技術(shù)擴增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對進行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測胰島類似細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能，可設計如下實驗：將等量的胰島類似細胞與正常胰島B細胞分別加入兩組相等濃度的培養(yǎng)液中，適宜且相同條件下進行培養(yǎng)，一段時間后分別檢測兩組培養(yǎng)液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優(yōu)點是。發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
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