腦心肌炎病毒（EMCV，其RNA結構如圖1）是引起人腦炎和心肌炎的病原體。為研制疫苗，科研人員按圖2流程培育轉基因酵母菌，來生產EMCV的衣殼蛋白VP1。其中受體酵母菌是組氨酸合成缺陷型，HIS4基因表達的酶催化組氨酸的合成，G418是一種抗生素。請回答下列問題：
（1）衣殼蛋白VP1的合成基因（目的基因）是將EMCV的RNA經(jīng)過 逆轉錄逆轉錄合成DNA，該過程與DNA復制相比，其特有的堿基配對方式為 U=AU=A。
（2）目的基因用PCR進行擴增，結合圖1分析，應先用 已知序列3和4已知序列3和4設計引物并擴增，擴增的產物轉移到另一試管中進行第二階段反應，不在同一試管完成的主要原因是 防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染。
（3）直接PCR是一種不經(jīng)核酸提取而直接使用動物或植物組織等直接進行擴增的PCR技術。下列敘述正確的有 BDBD。
A、Taq酶與模板DNA上的復制原點結合，啟動PCR過程
B、該方法無須進行繁瑣的標本DNA提純的預處理
C、該方法變性溫度為生物體內的最適溫度
D、該方法擴增原核生物DNA的效果可能優(yōu)于真核生物
圖3是直接PCR和常規(guī)PCR的電泳圖，泳道1最可能是 直接直接PCR結果。
（4）構建重組質粒：將NotⅠ切開的載體與添加同源序列的VP1混合，用特定的DNA酶處理形成質粒--VP1結合體（質粒2）并導入大腸桿菌，利用大腸桿菌中的 DNA聚合酶、DNA連接DNA聚合酶、DNA連接酶等完成質粒的環(huán)化。過程③將質粒2導入大腸桿菌除前述目的，還能實現(xiàn) 讓其在大腸桿菌中復制讓其在大腸桿菌中復制。
（5）線性DNA整合到酵母細胞染色體DNA時，可能是單拷貝整合，也可能是多拷貝整合。過程⑦先將酵母菌培養(yǎng)在缺乏 組氨酸組氨酸的培養(yǎng)基中，篩選獲得導入目的基因的酵母菌；然后將篩選出的酵母菌接種于含2mg?L-1G418的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，選擇生長良好的酵母菌再轉接到含4mg?L-1G418的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，其目的是 篩選出目的基因多拷貝整合的酵母菌篩選出目的基因多拷貝整合的酵母菌。
（6）研究人員用兔抗EMCV血清與酵母細胞生產的VP1蛋白進行抗原—抗體免疫反應試驗，其目的是 檢測酵母細胞生產的VP1與EMCV的VP1的抗原性（結構）是否一致檢測酵母細胞生產的VP1與EMCV的VP1的抗原性（結構）是否一致。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】逆轉錄；U=A；已知序列3和4；防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染；BD；直接；DNA聚合酶、DNA連接；讓其在大腸桿菌中復制；組氨酸；篩選出目的基因多拷貝整合的酵母菌；檢測酵母細胞生產的VP1與EMCV的VP1的抗原性（結構）是否一致
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：20引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7