黃曲霉素是黃曲霉菌等霉菌產(chǎn)生的對(duì)人和動(dòng)物具有劇毒、強(qiáng)致癌的一類代謝產(chǎn)物，包括AFB₁、AFB₂、AFG₁、AFG₂、AFM₁等幾種。其中AFB₁是對(duì)玉米和花生造成污染最嚴(yán)重的黃曲霉素。通過制備單克隆抗體可明顯提高對(duì)玉米等糧食中黃曲霉素檢測(cè)的靈敏度和特異性。
（1）AFB₁進(jìn)入細(xì)胞后能與tRNA結(jié)合形成復(fù)合物，抑制tRNA與某些氨基酸結(jié)合，從而干擾基因表達(dá)的

翻譯

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過程。AFB₁能特異性誘發(fā)人肝細(xì)胞中抑癌基因p53發(fā)生堿基對(duì)替換，從而使該基因發(fā)生

突變

突變

，誘發(fā)肝癌。
（2）以下是抗AFB₁的單克隆抗體的簡要制備思路。
①AFB₁屬于小分子物質(zhì)，不具有刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體的免疫原性，制備時(shí)需要將AFB₁與某些物質(zhì)結(jié)合成具有免疫原性的完全抗原。下列物質(zhì)中不能參與合成完全抗原的是

c、d、e

c、d、e

。
a.牛血清白蛋白b.卵清蛋白       c.丙氨酸d.葡萄糖       e.香豆素
②將經(jīng)完全抗原AFB₁-BSA（BSA是牛血清白蛋白）免疫的小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞通過融合，經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選和檢測(cè)等過程，最終選擇出

抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤（能產(chǎn)生抗AFB₁抗體的雜交瘤）

抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤（能產(chǎn)生抗AFB₁抗體的雜交瘤）

細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中分離提純得到抗AFB₁的抗體。
③利用抗原—抗體雜交技術(shù)對(duì)抗AFB₁抗體進(jìn)行特異性和靈敏度鑒定。下表是三種抗AFBI抗體的交叉反應(yīng)鑒定結(jié)果。

被測(cè)黃曲霉素	AFB1	AFB2	AFG1	AFG2	AFM1
2A11交叉反應(yīng)率（%）	100	17.1	0.56	0.37	未檢測(cè)到
3A12交叉反應(yīng)率（%）	100	7.8	20.2	0.6	＜0.1
3G1交叉反應(yīng)率（%）	100	6.4	＜0.1	＜0.1	未檢測(cè)到

注：交叉反應(yīng)率表示抗體和抗原或抗原類似物的結(jié)合程度
I．上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果中，3種抗AFB₁抗體與除AFB₁外的其他黃曲霉素均能發(fā)生一定的反應(yīng)，原因是

AFB₁與其他黃曲霉素在結(jié)構(gòu)上有相似性

AFB₁與其他黃曲霉素在結(jié)構(gòu)上有相似性

。
Ⅱ．根據(jù)交叉反應(yīng)結(jié)果，應(yīng)選用能產(chǎn)生

3G₁

3G₁

抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)以獲得大量的該抗體用于檢測(cè)。
（3）香豆素（C₉H₆O₂）是一種對(duì)人畜低毒的AFB₁結(jié)構(gòu)類似物。玉米種植土壤中存在利用胞外酶降解AFB₁的多種微生物?，F(xiàn)要對(duì)已污染的玉來樣品進(jìn)行AFB₁的微生物脫毒處理，請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)安全，有效的生物處理方案。