如圖所示為A,B、C三種質(zhì)粒和一個(gè)含目的基因D的DNA片段示意圖。圖中Ap為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因,lacZ為藍(lán)色顯色基因,EcoRⅠ,PvuⅠ為兩種限制酶,質(zhì)粒上限制酶括號(hào)內(nèi)的數(shù)字表示限制酶切割位點(diǎn)與復(fù)制原點(diǎn)的距離?;卮鹣铝袉栴}:
(1)據(jù)圖分析質(zhì)粒A、C一般不能作為運(yùn)載體的理由分別是 (質(zhì)粒A)缺少標(biāo)記基因(質(zhì)粒A)缺少標(biāo)記基因、(質(zhì)粒A)缺少標(biāo)記基因、(質(zhì)粒C)復(fù)制原點(diǎn)會(huì)被限制酶切割(質(zhì)粒A)缺少標(biāo)記基因、(質(zhì)粒C)復(fù)制原點(diǎn)會(huì)被限制酶切割。若要獲取目的基因,應(yīng)該選用 PvuⅠPvuⅠ酶切割。
(2)將圖中的目的基因與質(zhì)粒B進(jìn)行重組。在基因工程的操作過程中,需要檢查目的基因是否重組到質(zhì)粒中,應(yīng)使用 EcoRⅠEcoRⅠ酶切重組質(zhì)粒,完全酶切后,進(jìn)行電泳檢測。若電泳圖譜中出現(xiàn)長度為1.1kb和5.6kb,或者 3.13.1kb和 3.63.6kb的片段,則可判斷該重組質(zhì)粒已與目的基因重組成功(重組質(zhì)粒上目的基因的插入位點(diǎn)與EcoRⅠ的識(shí)別位點(diǎn)之間的堿基對(duì)忽略不計(jì))。
(3)若選擇自身不含lacZ基因并對(duì)抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,則如何篩選成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞?在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導(dǎo)入處理的大腸桿菌,能形成白色菌落的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導(dǎo)入處理的大腸桿菌,能形成白色菌落的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌。目的基因能在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出相同的蛋白質(zhì),其遺傳學(xué)基礎(chǔ)是 自然界的生物共用一套遺傳密碼子自然界的生物共用一套遺傳密碼子。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】(質(zhì)粒A)缺少標(biāo)記基因;(質(zhì)粒A)缺少標(biāo)記基因、(質(zhì)粒C)復(fù)制原點(diǎn)會(huì)被限制酶切割;PvuⅠ;EcoRⅠ;3.1;3.6;在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)經(jīng)過導(dǎo)入處理的大腸桿菌,能形成白色菌落的即為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌;自然界的生物共用一套遺傳密碼子
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:17引用:2難度:0.6
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3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
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