羊乳因其營養(yǎng)成分最接近人乳,且不含牛乳中某些可致過敏的蛋白質(zhì)(如牛乳酪蛋白)而受到消費(fèi)者的青睞,但市場上存在著用牛乳冒充羊乳欺騙消費(fèi)者的現(xiàn)象。對此,研究人員開發(fā)制備了羊乳as1-酪蛋白單克隆抗體檢測試劑盒。請回答下列問題。
(1)用 羊乳as1-酪蛋白羊乳as1-酪蛋白多次免疫小鼠,取小鼠脾臟組織剪碎后用 胰蛋白酶胰蛋白酶處理,分散成單個(gè)細(xì)細(xì)胞后與 骨髓瘤骨髓瘤細(xì)胞混合,誘導(dǎo)細(xì)胞融合后篩選出雜交瘤細(xì)胞。
(2)將得到的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng),隨后進(jìn)行抗體檢測。檢測原理及操作流程如圖1,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2。
①實(shí)驗(yàn)過程中,將特定抗原固定在固相載體后,依次將 待檢抗體、酶標(biāo)抗體、底物待檢抗體、酶標(biāo)抗體、底物加入到反應(yīng)體系,測吸光值,顏色越深吸光值越高,說明待測樣本中的單克隆抗體含量 越高越高。實(shí)驗(yàn)過程中第一次“洗脫”最主要的目的是 洗去未與抗原結(jié)合的抗體洗去未與抗原結(jié)合的抗體。
②實(shí)驗(yàn)中常用半抑制濃度(IC50)評價(jià)抗體靈敏度,即取同樣濃度的不同來源抗體,分別檢測一半抗體被同一種抗原結(jié)合時(shí)所需抗原的最低濃度。圖2為I~I(xiàn)V四組雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液抗體相對濃度和IC50值。據(jù)圖分析,制備羊乳as1-酪蛋白單克隆抗體時(shí)應(yīng)選擇 ⅣⅣ號(hào)雜交瘤細(xì)胞,理由是 抗體相對濃度高,IC50值低、抗體靈敏度高抗體相對濃度高,IC50值低、抗體靈敏度高。
③進(jìn)一步對篩選到的單克隆抗體進(jìn)行特異性檢測。分別將 羊乳as1-酪蛋白和牛乳酪蛋白羊乳as1-酪蛋白和牛乳酪蛋白固定在固相載體上,然后按圖1流程依次操作,測定結(jié)果顯示該單克隆抗體只對羊乳asl-酪蛋白呈陽性。
(3)用得到的單克隆抗體制備檢測試劑盒,對市面上的4類乳品(乳品1、乳品2、乳品3、乳品4)進(jìn)行檢測,結(jié)果如下表,結(jié)果說明 乳品1、乳品2含有較多的羊乳asl-酪蛋白,乳品3、乳品4中幾乎不含乳品1、乳品2含有較多的羊乳asl-酪蛋白,乳品3、乳品4中幾乎不含。
表:樣品檢測結(jié)果
檢測樣品 | 空白對照 | 羊乳as1-酪蛋白 | 乳品1 | 乳品2 | 乳品3 | 乳品4 |
吸光值 | 0 | 1.554 | 1.488 | 1.510 | 0.076 | 0.065 |
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】羊乳as1-酪蛋白;胰蛋白酶;骨髓瘤;待檢抗體、酶標(biāo)抗體、底物;越高;洗去未與抗原結(jié)合的抗體;Ⅳ;抗體相對濃度高,IC50值低、抗體靈敏度高;羊乳as1-酪蛋白和牛乳酪蛋白;乳品1、乳品2含有較多的羊乳asl-酪蛋白,乳品3、乳品4中幾乎不含
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:2難度:0.7
相似題
-
1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5 -
3.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7
相關(guān)試卷