甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌,研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇?nbsp;并成功表達(dá)?;卮鹣铝袉?wèn)題。
(1)獲取目的基因是實(shí)施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有 從基因文庫(kù)中獲取從基因文庫(kù)中獲取、人工合成人工合成(答出兩種)。
(2)要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達(dá),需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細(xì)胞,原因是 目的基因無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子目的基因無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子和 目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)目的基因不能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)目的基因不能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在。
(3)甲醇酵母菌可高效表達(dá)外源蛋白質(zhì)并分泌到細(xì)胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這一特點(diǎn)的優(yōu)點(diǎn)在于 便于目的蛋白的分離和純化便于目的蛋白的分離和純化,甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細(xì)胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是 甲醉酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體甲醉酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體。
(4)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是 防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】從基因文庫(kù)中獲?。蝗斯ず铣?;目的基因無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子;目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)目的基因不能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在;便于目的蛋白的分離和純化;甲醉酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體;防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:17引用:1難度:0.7
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