枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶在醫(yī)藥和化工等領(lǐng)域具有重要的價(jià)值。為篩選蛋白酶產(chǎn)量高的枯草芽孢桿菌菌株,分別將浸過(guò)不同菌株的提取液(a-e)及無(wú)菌水(f)的無(wú)菌圓紙片置于平板培養(yǎng)基表面,在37℃恒溫箱中放置2-3天,結(jié)果如圖1.請(qǐng)回答問(wèn)題:
(1)在篩選枯草芽孢桿菌蛋白酶高產(chǎn)菌株時(shí),培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)包括水、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、葡萄糖、
蛋白質(zhì)(酪蛋白)
蛋白質(zhì)(酪蛋白)
。培養(yǎng)枯草芽孢桿菌時(shí),常用搖床進(jìn)行振蕩培養(yǎng),目的是
增加培養(yǎng)液中的溶氧量并使菌株與培養(yǎng)液充分接觸,有利于目的菌的生長(zhǎng)繁殖
增加培養(yǎng)液中的溶氧量并使菌株與培養(yǎng)液充分接觸,有利于目的菌的生長(zhǎng)繁殖
。
(2)a-e中蛋白酶產(chǎn)量最高的菌株是
a
a
(用字母回答),判斷依據(jù)是
a周圍的透明圈最大,說(shuō)明其產(chǎn)生的蛋白酶數(shù)量多或活性高
a周圍的透明圈最大,說(shuō)明其產(chǎn)生的蛋白酶數(shù)量多或活性高
。
(3)利用凝膠色譜法分離提取到的部分蛋白質(zhì)時(shí),等樣品完全進(jìn)入凝膠層后,加入pH為7.0、濃度為20mmol/L的
磷酸緩沖液
磷酸緩沖液
到適當(dāng)高度進(jìn)行洗脫,結(jié)果先洗脫出來(lái)的是
相對(duì)分子質(zhì)量較大
相對(duì)分子質(zhì)量較大
的蛋白質(zhì)。
(4)質(zhì)監(jiān)局為了檢驗(yàn)標(biāo)有含該蛋白酶的加酶洗衣粉質(zhì)量,設(shè)計(jì)了如圖2所示實(shí)驗(yàn)。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果是
A組膠片上的蛋白膜消失,B組膠片上的蛋白膜未消失
A組膠片上的蛋白膜消失,B組膠片上的蛋白膜未消失
,則說(shuō)明該洗衣粉中含有蛋白酶。若用該實(shí)驗(yàn)來(lái)判斷此酶活性大小可通過(guò)觀察
膠片上的蛋白膜消失所需時(shí)間的長(zhǎng)短(相同時(shí)間內(nèi)蛋白膜消失的面積)
膠片上的蛋白膜消失所需時(shí)間的長(zhǎng)短(相同時(shí)間內(nèi)蛋白膜消失的面積)
實(shí)現(xiàn)。