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表面展示技術(shù)是通過(guò)重組DNA技術(shù),將外源蛋白與細(xì)胞表面的蛋白質(zhì)組裝成融合蛋白,從而可展示在細(xì)胞表面?;卮鹣铝袉?wèn)題。
(1)若要將芽孢表面蛋白基因cotB與外源的綠色熒光蛋白基因gfp構(gòu)建成基因表達(dá)載體,下圖中最適合通過(guò)綠色熒光(綠色熒光蛋白在紫外光下會(huì)產(chǎn)生綠色熒光)確定融合蛋白成功表達(dá)的是
C
C

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注:Ampr為氨芐青霉素抗性基因;→表示轉(zhuǎn)錄方向;UAG,UAA,UGA是終止密碼子,AUG是起始密碼子。
(2)芽孢表面蛋白是實(shí)現(xiàn)表面展示技術(shù)的關(guān)鍵蛋白,結(jié)合上述材料,試分析該蛋白在表面展示技術(shù)中的作用是
芽孢表面蛋白是可以定位在細(xì)胞表面的,在與外源蛋白形成融合蛋白后,可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面
芽孢表面蛋白是可以定位在細(xì)胞表面的,在與外源蛋白形成融合蛋白后,可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面
。
(3)導(dǎo)入基因表達(dá)載體后的芽孢桿菌接種在含有
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的固體培養(yǎng)基上,以獲得攜帶載體的單菌落,該過(guò)程被稱為微生物的
選擇
選擇
培養(yǎng)。
(4)培養(yǎng)基中可能既有含基因表達(dá)載體的單菌落,也有含
空載體
空載體
的單菌落,因此還需要對(duì)DNA進(jìn)行提取,常用酒精初步分離DNA和蛋白質(zhì),這里酒精的作
用原理是
DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精
DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精
。
(5)若要確定表面展示技術(shù)在芽孢桿菌上構(gòu)建成功,應(yīng)在紫外光環(huán)境下對(duì)其進(jìn)行
個(gè)體
個(gè)體
水平的檢測(cè)。

【答案】C;芽孢表面蛋白是可以定位在細(xì)胞表面的,在與外源蛋白形成融合蛋白后,可將外源蛋白展示/定位在芽孢桿菌表面;氨芐青霉素;選擇;空載體;DNA不溶于酒精,但某些蛋白質(zhì)溶于酒精;個(gè)體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:30引用:3難度:0.7
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  • 1.某種結(jié)腸癌細(xì)胞存在抑癌基因A的突變,研究人員準(zhǔn)備利用DNA重組技術(shù)將突變的抑癌基因A克隆到質(zhì)粒載體上,用于后續(xù)癌癥發(fā)生機(jī)制和癌癥治療的研究。下列說(shuō)法正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/28 10:30:1組卷:5引用:2難度:0.7
  • 2.最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進(jìn)展.
    (1)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合時(shí),必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運(yùn)載體有
     
    、
     
    、
     
    等,而作為運(yùn)載體必須具備相應(yīng)的條件,例如應(yīng)具有
     
    以便進(jìn)行篩選.進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí),通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應(yīng)器時(shí),應(yīng)使外源基因在小鼠的
     
    細(xì)胞中特異性表達(dá).
    (5)如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中,從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血?jiǎng)谂R床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動(dòng)物的乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)出了人的抗凝血酶,如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達(dá)載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問(wèn)題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴(kuò)增獲取抗凝血酶基因,應(yīng)選用引物
     
    (填引物名稱),擴(kuò)增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    (2)所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動(dòng)子,其作用是
     
    ,將構(gòu)建的基因表達(dá)載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長(zhǎng)出了多個(gè)大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒,再通過(guò)
     
    方法導(dǎo)入到豬或羊的
     
    細(xì)胞內(nèi),通過(guò)培養(yǎng)即可獲得能表達(dá)人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4引用:1難度:0.6
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