與棉花發(fā)育相關(guān)的GhMADS12基因能調(diào)節(jié)棉花根、莖、葉、花的發(fā)育和果實(shí)的成熟?？茖W(xué)家將克隆得到的GhMADS12基因與運(yùn)載體結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程如圖所示。請回答下列問題：
（1）若用PCR技術(shù)擴(kuò)增GhMADS12基因，需要在PCR儀中加入22種引物，引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始復(fù)制使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始復(fù)制。除了引物、DNA模板之外，PCR反應(yīng)體系中還需提供Taq酶、dNTPTaq酶、dNTP。（至少答2條）
（2）GhMADS12 和pBI121質(zhì)粒T-DNA經(jīng)限制酶SmaⅠ和XbaⅠ切割斷開的化學(xué)鍵是磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。原核生物中的限制酶不切割自身DNA的原因是不具有切割自身DNA的限制酶或?qū)A基序列甲基化，使限制酶無法識別不具有切割自身DNA的限制酶或?qū)A基序列甲基化，使限制酶無法識別。
（3）圖中的CaMV35S為啟動子，GUS為標(biāo)記基因，NOS為終止子，據(jù)圖分析，目的基因GhMADS12插入的具體位點(diǎn)是BB。
A.啟動子的上游
B.啟動子的下游，終止子的上游
C.終止子的下游
D.任意位點(diǎn)
（4）ChMADS12基因進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞并在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化，該過程常用Ca2+處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于能吸收周圍DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞。
【考點(diǎn)】目的基因的篩選與獲取．
【答案】2；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始復(fù)制；Taq酶、dNTP；磷酸二酯鍵；不具有切割自身DNA的限制酶或?qū)A基序列甲基化，使限制酶無法識別；B；轉(zhuǎn)化；感受態(tài)細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：43引用：1難度：0.6
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1．通過設(shè)計引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。有關(guān)敘述正確的是（ ?。?/h2>發(fā)布：2024/11/19 10:30:1組卷：113引用：5難度：0.7 -
2．雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)通過PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等，還需加入的原料是（ ?。?br />
①dCTP，dGTP，dATP
②dGTP，dATP，dTTP，dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTP發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：25引用：1難度：0.6 -
3．目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列，一般基于兩種不同的方法，即DNA克隆和DNA分子雜交，如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?/h2>發(fā)布：2024/11/22 4:0:1組卷：20引用：2難度：0.6
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