器官移植已成為治療臟器功能衰竭的有效手段，但移植排斥是影響移植物和患者存活的主要問題。同種異體排斥反應(yīng)的細(xì)胞學(xué)機(jī)制主要為T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。其中白細(xì)胞介素-2（IL-2）參與移植排斥反應(yīng)。白細(xì)胞介素-2（IL-2）是主要由活化的CD++細(xì)胞產(chǎn)生的免疫調(diào)節(jié)因子，對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用。科學(xué)工作者將含IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒pPIC9K構(gòu)建成重組質(zhì)粒，并導(dǎo)入酵母菌GS15（組氨酸缺陷菌株，不能合成組氨酸）中，篩選到了能分泌IL-2的工程菌株。請(qǐng)回答：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶，質(zhì)粒上的啟動(dòng)子的作用是 作為RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄作為RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。根據(jù)上圖分析，為了構(gòu)建重組質(zhì)粒應(yīng)該選用 EcoRⅠ酶和NotⅠ酶EcoRⅠ酶和NotⅠ酶（填酶）分別切割含有IL-2基因的DNA片段和質(zhì)粒。
（2）用不含組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，有導(dǎo)入了質(zhì)粒pPIC9K和導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的兩種酵母菌細(xì)胞。這兩種類型的細(xì)胞能否被篩選出來，若能，則說明篩選的原理；若不能，則說明篩選的措施。 不能，用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選不能，用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
（3）制備能分泌IL-2的工程菌株宜用酵母菌作為受體細(xì)胞，而不適合用大腸桿菌。從細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的角度分析，原因是 酵母菌是真核細(xì)胞，其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾酵母菌是真核細(xì)胞，其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶和DNA連接酶；作為RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄；EcoRⅠ酶和NotⅠ酶；不能，用含有四環(huán)素和組氨酸的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；酵母菌是真核細(xì)胞，其含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工修飾
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/7 8:0:9組卷：5引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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