科研人員利用多種途徑研制了抗新冠病毒的單克隆抗體,圖甲是抗新冠病毒單克隆抗體的制備示意圖。已知正常細(xì)胞(包括B細(xì)胞)內(nèi)DNA合成途徑包括正常途徑和補(bǔ)救途徑,甲氨蝶呤(A)能阻斷DNA的正常合成途徑;補(bǔ)救途徑則是利用從環(huán)境中獲取的次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T),經(jīng)激酶或轉(zhuǎn)化酶的催化合成DNA(如圖乙所示),而骨髓瘤細(xì)胞缺失補(bǔ)救途徑的激酶或轉(zhuǎn)化酶。據(jù)此回答下列問題:
(1)①過程需要用到 PEG(聚乙二醇)PEG(聚乙二醇)(化學(xué)物質(zhì))促進(jìn)細(xì)胞融合。
(2)若只考慮①過程中細(xì)胞的兩兩融合,②過程中需要進(jìn)行細(xì)胞篩選(B細(xì)胞和B細(xì)胞融合的B-B細(xì)胞由于不能增殖,不用對其篩選;瘤細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合的瘤—瘤細(xì)胞具有增殖能力需要淘汰)。根據(jù)DNA合成途徑制備雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)基,應(yīng)該在普通動物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入 甲氨蝶呤(A)、次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)甲氨蝶呤(A)、次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T),該培養(yǎng)基能起到選擇作用的機(jī)理是 普通動物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入甲氨蝶呤阻斷瘤—瘤細(xì)胞中的DNA合成途徑,使其無法增殖。而加入次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷能夠使雜交瘤細(xì)胞中DNA補(bǔ)救途徑發(fā)揮作用而存活普通動物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入甲氨蝶呤阻斷瘤—瘤細(xì)胞中的DNA合成途徑,使其無法增殖。而加入次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷能夠使雜交瘤細(xì)胞中DNA補(bǔ)救途徑發(fā)揮作用而存活。
(3)④和⑤過程分別需要 逆轉(zhuǎn)錄酶、限制酶和DNA連接逆轉(zhuǎn)錄酶、限制酶和DNA連接酶。⑥過程需要用CaCl2處理大腸桿菌使之處于 感受態(tài)感受態(tài),有利于將抗體合成基因?qū)氪竽c桿菌。將抗體合成基因?qū)氪竽c桿菌并使之穩(wěn)定表達(dá)的過程,稱之為 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化。
(4)抗新冠病毒單抗與普通的抗新冠病毒抗體相比,優(yōu)點是 特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可以大量制備特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可以大量制備。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】PEG(聚乙二醇);甲氨蝶呤(A)、次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T);普通動物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入甲氨蝶呤阻斷瘤—瘤細(xì)胞中的DNA合成途徑,使其無法增殖。而加入次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷能夠使雜交瘤細(xì)胞中DNA補(bǔ)救途徑發(fā)揮作用而存活;逆轉(zhuǎn)錄酶、限制酶和DNA連接;感受態(tài);轉(zhuǎn)化;特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可以大量制備
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:12引用:1難度:0.5
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
A.向小鼠注入抗原后提取B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞 B.可通過將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠細(xì)胞制備嵌合抗體F′ C.據(jù)圖推測,抗體基因序列被替換后改變了與抗原的結(jié)合位點 D.在共同作用實驗中,當(dāng)F′濃度較高時,抗原更多與F′結(jié)合 發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實驗材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實驗流程。下列敘述錯誤的是( )
A.在動物細(xì)胞培養(yǎng)時,培養(yǎng)液中除營養(yǎng)物質(zhì)外還要添加一定量的血清、血漿 B.動物細(xì)胞培養(yǎng)時通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將其置于含有95%O2加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng) C.圖中篩選1的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞 D.若B淋巴細(xì)胞的基因型為HH,骨髓瘤細(xì)胞的基因型為SS,在兩兩融合后,基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS 發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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