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如圖1表示某生物DNA結(jié)構(gòu)的一部分及限制酶的識別序列和酶切位點，請回答以下問題。
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限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindlⅢ SacⅠ
識別序列和切割位點 G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT GAGCT↓C
（1）若目的基因為抗蟲基因，需要在連接Ti質(zhì)粒前進行PCR擴增，需要在樣本中再加入
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）
，一般要經(jīng)歷多次循環(huán)，每次循環(huán)可以分為
變性、復性、延伸
變性、復性、延伸
三步。擴增后切割目的基因，應使用表中的限制酶是
EcoRI和SacI
EcoRI和SacI
，這樣做的原因是
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）
。
（2）若目的基因為胰島素基因，科研人員構(gòu)建了如圖2所示的重組載體，tetr為四環(huán)素抗性基因，ampr為氨芐青霉素抗性基因。構(gòu)建重組載體需要的酶有
DNA連接酶和限制酶
DNA連接酶和限制酶
。在重組質(zhì)粒上插入大腸桿菌復制原點的目的是
使重組載體能在大腸桿菌中復制擴增
使重組載體能在大腸桿菌中復制擴增
。圖2中的啟動子上有
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的識別和結(jié)合位點，從而驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。將重組載體導入大腸桿菌體內(nèi)后，將其涂布于含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的選擇培養(yǎng)基上。

【答案】引物、原料（或脫氧核苷酸或dNTP）、酶（Taq酶）；變性、復性、延伸；EcoRI和SacI；可以防止目的基因和Ti質(zhì)粒自身環(huán)化（保證Ti質(zhì)粒與目的基因的正確連接）；DNA連接酶和限制酶；使重組載體能在大腸桿菌中復制擴增；RNA聚合酶；氨芐青霉素
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：36引用：5難度：0.5
相似題

  • 1．最近，科學家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中．這是繼哺乳動物乳腺生物反應器研發(fā)成功后，在膀胱生物反應器研究上另一進展．
    （1）將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細胞，常用的方法是
     
    ．所使用到儀器是
     
    ．
    （2）在基因工程中，將目的基因與運載體結(jié)合時，必須用
     
    酶和
     
    酶．常用的運載體有
     
    、
     
    、
     
    等，而作為運載體必須具備相應的條件，例如應具有
     
    以便進行篩選．進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的
     
    中，原因是
     
    ．
    （3）通常采用
     
    技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中．
    （4）在研究膀胱生物反應器時，應使外源基因在小鼠的
     
    細胞中特異性表達．
    （5）如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細胞中，從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     
    ．

    發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：3引用：1難度：0.3

  • 2．目前，科學家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：5引用：1難度：0.9

  • 3．抗凝血酶是一種天然抗凝血劑，在臨床上被廣泛應用。目前科學家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應器中表達出了人的抗凝血酶，如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，回答下列問題：
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    （1）現(xiàn)有以下4種引物，引物A15'-GGACCCCGGG-3'；引物B：5'-CATTTCTAGA-3'；引物C：5'-CCTGGGGCCC-3'；引物D：5'-GTAAAGATCT-3'；，利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因，應選用引物
     
    （填引物名稱），擴增產(chǎn)物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
    （2）所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子，其作用是
     
    ，將構(gòu)建的基因表達載體先導入大腸桿菌細胞，然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上，長出了多個大腸桿菌菌落，這些菌落并非都是目的菌株，原因是
     
    。
    （3）將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒，再通過
     
    方法導入到豬或羊的
     
    細胞內(nèi)，通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應器。

    發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：4引用：1難度：0.6
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