如圖1表示利用基因工程制備抗體的基本途徑。據(jù)圖回答下列問題是:
(1)圖中的細(xì)胞①是 漿細(xì)胞漿細(xì)胞細(xì)胞,過程②需 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。
(2)圖中將目的基因?qū)氪竽c桿菌的過程中,不需要不需要(填“要”或“不需要”)利用Ca處理大腸桿菌制備感受態(tài)細(xì)胞,原因 噬菌體可以侵染大腸桿菌,將重組DNA分子注入大腸桿菌噬菌體可以侵染大腸桿菌,將重組DNA分子注入大腸桿菌。
(3)抗體基因可以用上圖的cDNA為模板通過PCR技術(shù)擴(kuò)增獲得,但是通過該方法獲得的抗體基因無限制酶識(shí)別序列,已知噬菌體DNA上的 啟動(dòng)子和終止子啟動(dòng)子和終止子之間有限制酶a和限制酶b的識(shí)別序列,所以需要在抗體基因的兩端分別加入限制酶a和限制酶b的識(shí)別序列,以保證抗體基因的正確插入和轉(zhuǎn)錄,具體操作如圖2。
則限制酶a和限制酶b的識(shí)別序列應(yīng)該分別位于引物1和引物2的 5'端5'端(3'端/5'端)。第3輪PCR結(jié)束后,含限制酶a和限制酶b的識(shí)別序列且兩條鏈等長(zhǎng)的DNA占 1414。
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【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】漿細(xì)胞;逆轉(zhuǎn)錄酶;不需要;噬菌體可以侵染大腸桿菌,將重組DNA分子注入大腸桿菌;啟動(dòng)子和終止子;5'端;
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【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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