科學家從某細菌中提取抗鹽基因,轉(zhuǎn)入煙草并培育成轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草,培育過程如圖1所示,圖2為相關(guān)限制酶識別序列及切割位點?;卮鹣铝袉栴}:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
識別序列及切劑位點 |
Sau3AⅠ酶和BamHⅠ酶
Sau3AⅠ酶和BamHⅠ酶
兩種限制酶切割。若Sau3AI酶切的DNA末端與BamHI酶切的DNA末端連接,該連接序列 不一定能
不一定能
(填“能”、“不能”或“不一定能”)被BamHI酶識別。(2)步驟①構(gòu)建的表達載體,除圖1中質(zhì)粒所示結(jié)構(gòu)外,還需具有
啟動子、終止子
啟動子、終止子
及目的基因:步驟②中需先用 Ca2+
Ca2+
處理農(nóng)桿菌以便將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌細胞;步驟③中通常需要添加酚類物質(zhì),其目的是 吸引農(nóng)桿菌移向煙草細胞,有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化
吸引農(nóng)桿菌移向煙草細胞,有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化
。(3)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細胞在固體培養(yǎng)基上培育成完整的植株需要用
植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)
技術(shù),此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加 植物激素(生長素和細胞分裂素)
植物激素(生長素和細胞分裂素)
。(4)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,圖2表示運用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。在培養(yǎng)基A篩選的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基B除了含有細菌生長繁殖必需的成分外,還應(yīng)加入
氨芐青霉素(或四環(huán)素或氨芐青霉素和四環(huán)素)
氨芐青霉素(或四環(huán)素或氨芐青霉素和四環(huán)素)
。從檢測篩選的結(jié)果分析,含有目的基因的是 4和6
4和6
菌落中的細菌。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】Sau3AⅠ酶和BamHⅠ酶;不一定能;啟動子、終止子;Ca2+;吸引農(nóng)桿菌移向煙草細胞,有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化;植物組織培養(yǎng);植物激素(生長素和細胞分裂素);氨芐青霉素(或四環(huán)素或氨芐青霉素和四環(huán)素);4和6
【解答】
【點評】
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