當(dāng)前新冠病毒的主要檢測手段有核酸檢測法和免疫學(xué)檢測法。請(qǐng)回答下列問題:
(1)核酸檢測方法:目前,新冠病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測主要依賴核酸檢測,包括以下兩種方法:
①全基因組測序:病原體宏基因組測序(mNGS)是目前臨床實(shí)踐中最常用的病原體基因測序方法。mNGS技術(shù)首先需要將病毒RNA制備成測序儀可以識(shí)別和分析的DNA文庫,需要將RNA 反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段,與 載體載體連接后儲(chǔ)存在 受體菌受體菌中。然后使用測序儀對(duì)核酸序列進(jìn)行檢測。檢測結(jié)果經(jīng)生物信息學(xué)軟件處理,最終展現(xiàn)出與病毒序列相關(guān)的信息。
②熒光PCR法:在常規(guī)PCR檢測的基礎(chǔ)上加入了熒光物質(zhì),通過監(jiān)測發(fā)光信號(hào)來進(jìn)行分析的一種方法。PCR利用 DNA(雙鏈)復(fù)制DNA(雙鏈)復(fù)制的原理,實(shí)現(xiàn)目的基因的擴(kuò)增,該過程首先需要設(shè)計(jì)引物,國家微生物科學(xué)數(shù)據(jù)中心公布了新冠病毒S蛋白的引物序列,已知其中一段引物的序列為CCCAACTTCTCCTCCTAGAAT,能否根據(jù)該引物序列設(shè)計(jì)出另一段引物的序列?不能不能(填“能”或“不能”),原因是 DNA雙鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,?fù)制時(shí)每條鏈的延伸方向都是5’-3’,該引物只能結(jié)合一條鏈的一端,無法據(jù)此確定另一引物的堿基序列(已知一端引物的堿基序列無法推斷另一端引物的堿基序列)DNA雙鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,?fù)制時(shí)每條鏈的延伸方向都是5’-3’,該引物只能結(jié)合一條鏈的一端,無法據(jù)此確定另一引物的堿基序列(已知一端引物的堿基序列無法推斷另一端引物的堿基序列)。目前在PCR反應(yīng)中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是 Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活。TaqMan是最為常用的一種具有熒光標(biāo)記的核酸探針,能與目標(biāo)基因特異性結(jié)合,利用原理是 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。
(2)免疫學(xué)檢測法:該技術(shù)基于血清中抗原和抗體的特異性結(jié)合進(jìn)行檢測。
①制備抗體:可以用到單克隆抗體的相關(guān)技術(shù),其過程是取產(chǎn)生免疫反應(yīng)的 脾(B淋巴)脾(B淋巴)細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞混合培養(yǎng),使其融合,最后篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞可以在體外進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)或注射到 小鼠腹腔內(nèi)小鼠腹腔內(nèi),雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中需要特殊的成分,通常需要加入 血清、血漿血清、血漿等一些天然成分。
②制備抗原:對(duì)新冠病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白基因進(jìn)行擴(kuò)增與克隆,構(gòu)建基因的 表達(dá)載體表達(dá)載體,導(dǎo)入大腸桿菌得到大量相關(guān)蛋白,純化后就可以作為抗原進(jìn)行檢測。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】反轉(zhuǎn)錄;載體;受體菌;DNA(雙鏈)復(fù)制;不能;DNA雙鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?,?fù)制時(shí)每條鏈的延伸方向都是5’-3’,該引物只能結(jié)合一條鏈的一端,無法據(jù)此確定另一引物的堿基序列(已知一端引物的堿基序列無法推斷另一端引物的堿基序列);Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活;堿基互補(bǔ)配對(duì)原則;脾(B淋巴);小鼠腹腔內(nèi);血清、血漿;表達(dá)載體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:1難度:0.5
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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