基因工程的第一步是篩選獲取目的基因，利用PCR技術(shù)獲取目的基因是一種常用的手段。圖示某DNA分子經(jīng)酶切后，DNA片段自身環(huán)化并利用PCR技術(shù)擴(kuò)增的部分過(guò)程。
（1）PCR與生物體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程不同，解旋時(shí)不需要解旋酶解旋酶酶催化而是通過(guò)90～95℃高溫處理90～95℃高溫處理實(shí)現(xiàn)的，因此PCR技術(shù)使用的DNA聚合酶必須是耐高溫（耐熱或熱穩(wěn)定）耐高溫（耐熱或熱穩(wěn)定）的。
（2）如果在某基因組中定位了一個(gè)目的基因X，其堿基序列未知，但已知X臨近區(qū)域的一段DNA序列，此時(shí)可利用圖示方法進(jìn)行目的基因的篩選和擴(kuò)增。作用于圖示多個(gè)酶切點(diǎn)的限制酶種類應(yīng)相同相同（相同/不同）。操作時(shí)根據(jù)圖中的已知序列已知序列設(shè)計(jì)引物，將含有目的基因的DNA片段克隆出來(lái)。為便于目的基因與載體結(jié)合，可在兩條引物兩條引物添加特定的限制酶識(shí)別序列。
（3）實(shí)踐中也常用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，這種技術(shù)是以RNA為模板。若利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增胰島素基因，應(yīng)選擇胰島B細(xì)胞胰島B細(xì)胞細(xì)胞提取RNA。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】解旋酶；90～95℃高溫處理；耐高溫（耐熱或熱穩(wěn)定）；相同；已知序列；兩條引物；胰島B細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：26引用：1難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過(guò)程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過(guò)程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個(gè)引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為?？蒲腥藛T通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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