新冠病毒是一種帶包膜的RNA病毒，膜表面的刺突蛋白（S蛋白）與宿主細胞膜表面的受體ACE2結(jié)合，介導病毒進入宿主細胞。進一步研究發(fā)現(xiàn)，RBD是S蛋白中負責和受體ACE2結(jié)合的關(guān)鍵蛋白?；谝陨涎芯?，某科研團隊研發(fā)了一種重組新冠病毒疫苗，制備過程如圖1所示。請回答下列問題：?
（1）為獲得更多的目的基因，可利用PCR技術(shù)進行擴增，擴增時應選擇

引物Ⅱ和引物Ⅲ

引物Ⅱ和引物Ⅲ

（填圖2中的序號）作引物，引物的作用是

使DNA聚合酶能夠從3'端開始連接脫氧核苷酸

使DNA聚合酶能夠從3'端開始連接脫氧核苷酸

，獲得的RBD蛋白基因不含有限制酶識別序列，這就需要在對目的基因進行PCR擴增時，在設(shè)計的目的基因引物的

5'

5'

（填“3'”或“5'”）端加上限制酶的識別序列。
（2）構(gòu)建RBD蛋白基因表達載體是制備疫苗的核心步驟，其目的是

使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，并能夠表達和發(fā)揮作用

使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，并能夠表達和發(fā)揮作用

?；虮磉_載體含有啟動子、終止子等成分，啟動子的作用是

RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

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（3）體外培養(yǎng)中國倉鼠卵巢細胞時，除了需要提供無菌、無毒的環(huán)境，還要定期更換培養(yǎng)液，其目的是 

以便清除代謝產(chǎn)物，防止對細胞造成危害

以便清除代謝產(chǎn)物，防止對細胞造成危害

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（4）為進一步檢測中國倉鼠卵巢細胞是否產(chǎn)生了RBD蛋白，需用

抗原-抗體雜交技術(shù)

抗原-抗體雜交技術(shù)

進行檢測，該檢測方法的原理是

抗原抗體特異性結(jié)合

抗原抗體特異性結(jié)合

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