除草劑的有效成分草甘膦能夠?qū)R坏囊种艵PSP合成酶的活性,從而使植物體內(nèi)多種代謝途徑受到影響而死亡。草甘膦起作用時沒有選擇性,它在除掉雜草的同時也會使作物受損。解決這個問題的有效方法是培育抗草甘膦作物。如圖是培育抗草甘膦棉的流程示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR擴增是獲取和擴增目的基因的常用方法,該方法的基本原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制,擴增過程中新形成的DNA單鏈的合成是 連續(xù)連續(xù)(填“連續(xù)”或“不連續(xù)”)的。
(2)培育過程中利用的限制酶必須滿足的基本條件是:不破壞目的基因和質(zhì)粒的結(jié)構(gòu);在Ti質(zhì)粒的T-DNA上有該限制酶的識別位點不破壞目的基因和質(zhì)粒的結(jié)構(gòu);在Ti質(zhì)粒的T-DNA上有該限制酶的識別位點(答兩點)、目的基因兩側(cè)有該限制酶的識別位點。根據(jù)來源不同,可將基因工程中的DNA連接酶分為 E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶兩大類。
(3)若圖中細菌X是農(nóng)桿菌,導(dǎo)入重組基因表達載體前需先用CaCl2處理,其目的是 使農(nóng)桿菌處于感受態(tài),容易從外界吸收DNA使農(nóng)桿菌處于感受態(tài),容易從外界吸收DNA,后將其接種到液體培養(yǎng)基中,適宜條件下培養(yǎng)10~12h,其目的是 擴大培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌擴大培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌。農(nóng)桿菌細胞內(nèi)的Ti質(zhì)粒上的T-DNA能轉(zhuǎn)移到被侵染宿主細胞內(nèi),并整合到 宿主細胞的染色體DNA宿主細胞的染色體DNA上;處理Y能成功的原因是 植物細胞具有全能性植物細胞具有全能性。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】DNA雙鏈復(fù)制;連續(xù);不破壞目的基因和質(zhì)粒的結(jié)構(gòu);在Ti質(zhì)粒的T-DNA上有該限制酶的識別位點;E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶;使農(nóng)桿菌處于感受態(tài),容易從外界吸收DNA;擴大培養(yǎng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌;宿主細胞的染色體DNA;植物細胞具有全能性
【解答】
【點評】
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(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
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