科研工作者將徑柳匙葉草液泡膜 Na+K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得了耐鹽新品種。圖1是含有目的基因的DNA片段，Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶（Sau3AⅠ、BamHⅠ切割形成的粘性末端相同）；圖2是農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)分析回答問題：
（1）將徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，再根據(jù)目的基因的特定序列從受體菌中提取該基因，這種獲取目的基因的方法稱為從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目的基因。
（2）計(jì)劃用EcoRⅠ分別切割圖1中DNA片段和圖2所示質(zhì)粒，以構(gòu)建基因表達(dá)載體。
①構(gòu)建表達(dá)載體除限制酶外還需要的工具酶是DNA連接酶DNA連接酶；
②本方案的缺陷是：可能導(dǎo)致目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒的反向連接。
③為避免上述缺陷，最佳方案是用EcoRⅠ、BamHⅠEcoRⅠ、BamHⅠ切割圖1的DNA，用EcoRⅠ、Sau3AⅠEcoRⅠ、Sau3AⅠ切割圖2質(zhì)粒。
（3）目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，還需要利用植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)才能得到轉(zhuǎn)基因棉花苗，這一技術(shù)的原理是細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性。
（4）要在個(gè)體生物學(xué)水平上檢測(cè)耐鹽新品種的培育效果，檢測(cè)方法是將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長(zhǎng)狀況將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長(zhǎng)狀況。
N
a
+
K
+
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】從基因文庫(kù)中獲取目的基因；DNA連接酶；目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化；EcoRⅠ、BamHⅠ；EcoRⅠ、Sau3AⅠ；植物組織培養(yǎng)；細(xì)胞的全能性；將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地，觀察其生長(zhǎng)狀況
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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