當前位置： 2021-2022學年湖北省鄂州市高二（下）期末生物試卷> 試題詳情

基因工程重組亞單位疫苗是預防新冠病毒感染和傳播的一種有效方案，其原理是把新冠病毒上負責“生產(chǎn)”S蛋白的那部分基因找到，構(gòu)建體外重組表達載體，導入到微生物體內(nèi)，“生產(chǎn)”出需要的S蛋白制成疫苗。下圖是在體外構(gòu)建病毒S蛋白重組表達載體的實驗流程及相關限制酶的酶切位點。回答下列問題：

限制酶 BamHI BclI Sau3AI HindIII

識別序列及切割位點

（1）從患者肺部組織中分離并提取得到病毒RNA，通過
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
獲得S蛋白的cDNA，再通過
PCR
PCR
法對S蛋白的基因進行擴增，擴增的一般步驟是
變性→復性→延伸
變性→復性→延伸
。
（2）用圖1中的質(zhì)粒X和圖2中的S蛋白基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應選用
BclⅠ和HindⅢ
BclⅠ和HindⅢ
兩種限制酶切割，切割后通過
DNA連接
DNA連接
酶作用獲得重組質(zhì)粒。
（3）轉(zhuǎn)化前，用含
Ca²⁺（CaCl₂）
Ca²⁺（CaCl₂）
的溶液處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。轉(zhuǎn)化后，將大腸桿菌置于含
四環(huán)素
四環(huán)素
的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，方便篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌。為進一步鑒定篩選出的大腸桿菌是否導入S蛋白基因，可用引物
甲、丙
甲、丙
進行擴增驗證。

【考點】基因工程的操作過程綜合．

【答案】逆轉(zhuǎn)錄；PCR；變性→復性→延伸；BclⅠ和HindⅢ；DNA連接；Ca²⁺（CaCl₂）；四環(huán)素；甲、丙

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：1引用：2難度：0.7

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1．利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述不正確的是（　?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

A．過程①是在小菜蛾細胞的細胞核中進行

B．過程②獲取的CarE基因中不含有啟動子

C．過程③進行前需要用Ca²⁺處理大腸桿菌

D．過程④可以利用DNA分子雜交技術(shù)鑒定目的基因是否已導入受體細胞

發(fā)布：2024/10/28 21:30:2組卷：25引用：2難度：0.7

解析

2．科學家對乳酸脫氫酶（LDH）進行了改造，使其能夠高效地生產(chǎn)高純度的苯乳酸?；卮鹣铝杏嘘P問題：
（1科學家改造乳酸脫氫酶時需要做的第一步是

。研究發(fā)現(xiàn)，要將LDH基因改造成為mLDH（改造后的乳酸脫氫酶）基因，需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸，使得活性中心增大，才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
①先將LDH基因片段連人載體中，形成環(huán)狀質(zhì)粒（如圖1）。

將突變后的序列設計在引物1中，以環(huán)狀質(zhì)粒為PCR的

，再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、

，以及堿基替換了的引物擴增LDH基因，PCR產(chǎn)物的序列便引入了預期的突變。
②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子，改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側(cè)，需要用

酶將產(chǎn)物兩端連接，獲得含有mLDH基因的質(zhì)粒。
（2）產(chǎn)生苯乳酸的過程還需FDH酶參與?，F(xiàn)需要構(gòu)建同時含有mLDH、FDH的基因表達載體。請你根據(jù)圖2，提出將兩個基因依次連入載體的思路：

（要體現(xiàn)選用的內(nèi)切酶和連接的先后順序）。

（3）上述科學實踐屬于生物工程中的

工程。在生命科學高速發(fā)展的今天，基因改造已十分成熟，但有一些紅線不能觸碰，請你舉出一例我國明令禁止的生物工程應用：

。
發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.6
解析

3．我國科學家將人類的生長激素（GH）基因?qū)膈庺~的受精卵，培育出能快速生長的轉(zhuǎn)基因鯉魚。下列敘述錯誤的是（　　）

A．轉(zhuǎn)基因鯉魚可以合成GH，說明轉(zhuǎn)基因鯉魚和人共用一套遺傳密碼子

B．GH基因在轉(zhuǎn)基因鯉魚和人細胞內(nèi)的表達過程均需要核糖體和線粒體參與

C．GH基因在轉(zhuǎn)基因鯉魚和人細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄時形成的堿基對種類不同

D．若替換轉(zhuǎn)基因鯉魚GH基因中的一個堿基對，則仍可能在其體內(nèi)檢測到GH

發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.7

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1．利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述不正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

3．我國科學家將人類的生長激素（GH）基因?qū)膈庺~的受精卵，培育出能快速生長的轉(zhuǎn)基因鯉魚。下列敘述錯誤的是（ ）

1．利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述不正確的是（　?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

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