將人IL-12基因表達載體導(dǎo)入T細(xì)胞,可促進T細(xì)胞的增殖分化,促進淋巴因子分泌,增強效應(yīng)T細(xì)胞的殺瘤活性?;卮鹣铝袉栴}:
(1)體外采用PCR技術(shù)擴增IL-12基因時,依據(jù)的原理是DNA(雙鏈)復(fù)制DNA(雙鏈)復(fù)制,該技術(shù)使用Taq酶而不使用細(xì)胞DNA聚合酶的主要原因是Taq酶熱穩(wěn)定性高,而細(xì)胞DNA聚合酶在高溫下會失活Taq酶熱穩(wěn)定性高,而細(xì)胞DNA聚合酶在高溫下會失活。
(2)構(gòu)建的IL-12基因表達載體的組成有IL-12基因、復(fù)制原點、啟動子、終止子、標(biāo)記基因啟動子、終止子、標(biāo)記基因(至少答2點)等,將其導(dǎo)入T細(xì)胞常采用的方法是顯微注射法顯微注射法。
(3)檢測IL-12基因在T細(xì)胞中是否翻譯出IL-12蛋白,可采用抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交,若出現(xiàn)雜交帶雜交帶,則成功翻譯。
(4)研究表明:正常機體T細(xì)胞導(dǎo)入IL-12基因表達載體后,抗體的數(shù)量明顯增多。原因是正常機體T細(xì)胞導(dǎo)入IL-12基因表達載體后,T細(xì)胞分泌淋巴因子增多,促進B細(xì)胞增殖、分化為漿細(xì)胞的能力增強,從而產(chǎn)生更多的抗體正常機體T細(xì)胞導(dǎo)入IL-12基因表達載體后,T細(xì)胞分泌淋巴因子增多,促進B細(xì)胞增殖、分化為漿細(xì)胞的能力增強,從而產(chǎn)生更多的抗體。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】DNA(雙鏈)復(fù)制;Taq酶熱穩(wěn)定性高,而細(xì)胞DNA聚合酶在高溫下會失活;啟動子、終止子、標(biāo)記基因;顯微注射法;抗原一抗體雜交;雜交帶;正常機體T細(xì)胞導(dǎo)入IL-12基因表達載體后,T細(xì)胞分泌淋巴因子增多,促進B細(xì)胞增殖、分化為漿細(xì)胞的能力增強,從而產(chǎn)生更多的抗體
【解答】
【點評】
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