纖毛是廣泛存在的細胞表面結構，功能異常可引起多種疾病。因此，研究纖毛形成的作用機制具有重要意義。請回答下列問題。
（1）纖毛結構如圖1所示，由細胞膜延伸形成的纖毛膜主要由
磷脂、蛋白質
磷脂、蛋白質
組成?；w由中心體轉變而來，中心體在有絲分裂中的功能是 發(fā)出星射線，形成紡錘體
發(fā)出星射線，形成紡錘體
。
（2）某病人腎小管上皮細胞纖毛異常，為了分析纖毛相關基因X是否發(fā)生了變異，對基因X進行了PCR擴增與產物測序。從細胞樣品中分離DNA時，可通過交替調節(jié)鹽濃度將與核蛋白結合的DNA分離出來，溶液中添加NaCl至2.0mo1/L的目的是 溶解DNA
溶解DNA
。PCR擴增時，需在 耐高溫DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）
耐高溫DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）
催化下，在引物 3′
3′
端進行DNA鏈的延伸，獲得擴增產物用于測序。
（3）為研究蛋白質X在細胞中的定位，構建綠色熒光蛋白GFP與x的融合蛋白，融合蛋白具有綠色熒光，可示其在細胞內位置。將X-GFP基因融合片段M導入如圖Ⅱ所示載體質粒Y，構建Y-M重組質粒（在EcoRⅤ位點插入片段）。請完成下表。
| 分步實驗目標 |
簡易操作、結果、分析 |
| PCR鑒定正向重組質粒Y-M（圖Ⅱ中融合片段M中有白色的箭頭，代表方向） |
①選擇圖Ⅱ引物 a、b a、b ；
②PCR目的產物約為 1100 1100 bp。 |
| 確保M及連接處序列正確Y-M的連接處上游含有Hind III+EcoR V的識別序列，下游含有EcoR V+BamH I的識別序列 |
③質粒測序，圖Ⅲ中正確的是 Q4 Q4 （選填序列編號） |
| 檢測融合蛋白定位 |
④對照質粒Y-GFP（僅表達GFP）與實驗質粒Y-M分別導入細胞，發(fā)現對照組整個細胞均有綠色熒光，而實驗組熒光集中在纖毛基部，說明 X蛋白參與中心體形成 X蛋白參與中心體形成 。 |
（4）為研究另一纖毛病相關基因Z表達的變化，采用熒光定量PCR法檢測健康人與病人基因Z的轉錄水平。采集樣本、提取總RNA，經
逆轉錄
逆轉錄
形成cDNA作為模板，PCR擴增結果顯示，在總cDNA模板量相等的條件下，健康人Ct值為15，而病人Ct值為20（Ct值是產物熒光強度達到設定閾值時的PCR循環(huán)數）。從理論上估算，在PCR擴增20個循環(huán)的產物中，健康人樣品的目的產物大約是病人的
32
32
倍。
