基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。圖中甲為限制酶EcoRI的識(shí)別序列，圖乙表示目的基因及限制酶切點(diǎn)，圖丙表示目的基因上的DNA片段，圖丁表示質(zhì)粒。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）從供體真核生物的某組織中獲取mRNA，并以此為模板反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生多種片段，與載體連接后儲(chǔ)存在一個(gè)受體菌群中，該受體菌群體叫 cDNAcDNA文庫(kù)，從該文庫(kù)中獲得的目的基因 不含不含（填“含”或“不含”）啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子。
（2）若用圖甲所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其專一性而言，切開(kāi)的是G和A所在的兩個(gè)核苷酸之間的 磷酸二酯磷酸二酯鍵，即圖丙的 ②②處。
（3）為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接，并且有利于受體細(xì)胞的篩選，提高重組效率，應(yīng)該選擇的限制酶是PstI和 EcoRIEcoRI，如果大腸桿菌是受體細(xì)胞，則其體內(nèi)應(yīng)不含 抗卡那霉素抗卡那霉素基因，以利于篩選出含質(zhì)粒的受體菌。
（4）PCR技術(shù)擴(kuò)增圖乙中的目的基因時(shí)，需要提供模板、dNTP、Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）、引物A和引物 DD等條件。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】cDNA；不含；磷酸二酯；②；EcoRI；抗卡那霉素；Taq酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）；D
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：4引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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