人感染乳頭瘤病毒（HPV）可誘發(fā)宮頸癌等惡性腫瘤，人乳頭瘤病毒疫苗可以預防由HPV引起的多種宮頸癌，是世界上第一個預防癌癥的疫苗。圖a是HPV疫苗制備所需的L1基因片段，圖b是某種質粒載體。

回答下列問題：
（1）為構建重組HPV疫苗，科研人員將L1基因插入質粒中，最好選擇限制酶

BamHI、HindⅢ

BamHI、HindⅢ

進行共同切割，原因是

不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控

不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控

（答出2點即可）。
（2）圖中啟動子為RNA聚合酶結合位點，該處序列應根據

大腸桿菌

大腸桿菌

（填“人宮頸細胞”或“乳頭瘤病毒”或“大腸桿菌”）的RNA聚合酶識別序列來設計。
（3）若將工具酶處理目的基因和質粒載體得到的混合物經過連接后轉化大腸桿菌，結果大腸桿菌有的未被轉化，有的含有質粒載體，有的含帶有目的基因的重組質粒。如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述三種大腸桿菌中，能夠正常生長的有

含有質粒載體和含有目的基因的重組質粒的大腸桿菌

含有質粒載體和含有目的基因的重組質粒的大腸桿菌

，這些大腸桿菌能正常生長的原因是

二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長

二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長

﹔若將上述篩選出來的大腸桿菌，培養(yǎng)在含有卡那霉素的固體培養(yǎng)基上，其生長情況可能是

含有質粒載體和含有目的基因的重組質粒的大腸桿菌二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長含有質粒載體的大腸桿菌能正常生長，而含有重組質粒的大腸桿菌不能生長

含有質粒載體和含有目的基因的重組質粒的大腸桿菌二者都含有氨芐青霉素抗性基因，可抗氨芐青霉素，在該培養(yǎng)基上均能生長含有質粒載體的大腸桿菌能正常生長，而含有重組質粒的大腸桿菌不能生長

、
（4）導入重組質粒的大腸桿菌表達產物衣殼蛋白L1經純化，可被免疫系統(tǒng)識別，引起免疫反應。與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，這樣的重組疫苗更安全又有效。從疫苗的組成成分分析，其主要原因是

衣殼蛋白L1無核酸成分，無繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激機體產生相應的抗體和記憶細胞，而傳統(tǒng)滅活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

衣殼蛋白L1無核酸成分，無繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激機體產生相應的抗體和記憶細胞，而傳統(tǒng)滅活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

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