非洲豬瘟病毒（ASFV）是一種對養(yǎng)豬業(yè)危害巨大的DNA病毒，ASFV的P54蛋白與病毒入侵細胞有關(guān)，具有良好的免疫原性。研究人員利用大腸桿菌表達P54蛋白，以制備單克隆抗體。請回答下列問題：
（1）以人工合成的P54基因為模板，利用PCR技術(shù)進行擴增，PCR的全稱是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；該過程在95℃、55℃、72℃三個溫度下進行循環(huán)，其中Taq酶發(fā)揮作用的溫度是72℃72℃。
（2）用T4DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒進行連接，T4DNA連接酶可連接黏性末端和平黏性末端和平末端；連接后，由兩個DNA片段形成的連接物最多有33種。
（3）將基因表達載體轉(zhuǎn)入感受態(tài)的大腸桿菌中，在適宜培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，收集并破碎菌體，純化蛋白質(zhì)，利用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交技術(shù)進行鑒定，可篩選出所需要的P54蛋白。
（4）將P54蛋白注入小鼠體內(nèi)，小鼠產(chǎn)生相應(yīng)抗體后，將B淋巴細胞與骨髓瘤骨髓瘤細胞融合，獲得雜交瘤細胞，篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，注入小鼠腹腔腹腔內(nèi)增殖，就可以獲得大量的單克隆抗體了；單克隆抗體的優(yōu)點有特異性強，靈敏度高，并可大量制備特異性強，靈敏度高，并可大量制備（答出3點）。
【答案】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；72℃；黏性末端和平；3；抗原-抗體雜交；骨髓瘤；腹腔；特異性強，靈敏度高，并可大量制備
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：1難度：0.7
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1．通過設(shè)計引物，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關(guān)敘述正確的是（ ）發(fā)布：2024/11/19 10:30:1組卷：116引用：5難度：0.7 -
2．雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)通過PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等，還需加入的原料是（ ?。?br />
①dCTP，dGTP，dATP
②dGTP，dATP，dTTP，dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTP發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：27引用：1難度：0.6 -
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