人的血清白蛋白(HSA)在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對(duì)血液制品顧慮重重。圖一是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑,其中報(bào)告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無(wú)色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。圖二為HSA基因兩側(cè)的核苷酸序列。圖三為相關(guān)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
(1)基因工程的核心步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建,完成過(guò)程②所需要技術(shù)手段是 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。
(2)采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因,根據(jù)其兩端序列,則需要設(shè)計(jì)的引物序列是 引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′。
(3)依據(jù)圖一、圖二和圖三分析,成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒用酶C處理將得到 22個(gè)DNA片段。
(4)圖一過(guò)程①中需將植物細(xì)胞與 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓 T-DNAT-DNA整合到植物細(xì)胞染色體DNA上,除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含 物質(zhì)K物質(zhì)K的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。
(5)過(guò)程④前對(duì)卵細(xì)胞供體母牛進(jìn)行 超數(shù)排卵超數(shù)排卵處理。過(guò)程通常將受精卵培養(yǎng)至 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚階段。過(guò)程⑤鑒定胚胎性別時(shí)常取 滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析。
(6)為檢測(cè)HSA基因的表達(dá)情況,可提取受體細(xì)胞的 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì),用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。
【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建;植物組織培養(yǎng);引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是3′-GTAAGTTAAGAG-5′;2;農(nóng)桿菌;T-DNA;物質(zhì)K;超數(shù)排卵;桑葚胚或囊胚;滋養(yǎng)層;蛋白質(zhì)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:2難度:0.6
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( )
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3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
(4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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