水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉,直鏈淀粉所占比例越小糯性越強(qiáng)??蒲腥藛T將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻,實(shí)現(xiàn)了對(duì)直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動(dòng)子序列的定點(diǎn)編輯,從而獲得了3個(gè)突變品系。
(1)將能表達(dá)出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時(shí),所需的酶是 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶,重組載體進(jìn)入水稻細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱為 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化。
(2)根據(jù)啟動(dòng)子的作用推測(cè),Wx基因啟動(dòng)子序列的改變影響了 RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合,從而改變了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平。與野生型水稻相比,3個(gè)突變品系中Wx基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列 不發(fā)生不發(fā)生(填:“發(fā)生”或“不發(fā)生”)改變,原因是 編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子。
(3)為檢測(cè)啟動(dòng)子變化對(duì)Wx基因表達(dá)的影響,科研人員需要檢測(cè)Wx基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA (Wx mRNA)的量。檢測(cè)時(shí)分別提取各品系胚乳中的總RNA,經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)過(guò)程獲得總cDNA.通過(guò)PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性的擴(kuò)增出Wx基因的cDNA,原因是 引物是根據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合)引物是根據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合)。
(4)各品系Wx mRNA量的檢測(cè)結(jié)果如圖所示,據(jù)圖推測(cè)糯性最強(qiáng)的品系為 品系3品系3,原因是 品系3的Wx mRNA最少,控制合成的直鏈淀粉合成酶最少,直鏈淀粉合成量最少,糯性最強(qiáng)品系3的Wx mRNA最少,控制合成的直鏈淀粉合成酶最少,直鏈淀粉合成量最少,糯性最強(qiáng)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶;轉(zhuǎn)化;RNA聚合酶與啟動(dòng)子的識(shí)別和結(jié)合;不發(fā)生;編碼直鏈淀粉合成酶的堿基序列中不含啟動(dòng)子;逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄);引物是根據(jù)Wx基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的(引物能與Wx基因的cDNA特異性結(jié)合);品系3;品系3的Wx mRNA最少,控制合成的直鏈淀粉合成酶最少,直鏈淀粉合成量最少,糯性最強(qiáng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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