回答下列有關基因工程的問題：
I．研究人員將某細菌的抗蟲基因C轉入棉花細胞內，成功獲得了抗蟲轉基因棉花，在一定程度上減少了殺蟲劑的使用，減少了環(huán)境污染，提高了作物的產量和質量。
（1）提取某細菌總RNA，經逆轉錄形成互補的DNA（cDNA），再利用PCR技術選擇性擴增C基因的cDNA，PCR過程中DNA先后經歷高溫變性→復性→延伸過程，故反應體系中需加入 （逆轉錄酶）和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）（逆轉錄酶）和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）酶。
（2）常用農桿菌與經 消毒消毒后的外植體共培養(yǎng)一段時間完成轉化，需先將C基因的cDNA插入到T質粒的T-DNA上并導入農桿菌，有利于 吸引農桿菌對受體細胞進行侵染吸引農桿菌對受體細胞進行侵染。若要檢測目的基因是否反向插入，不能不能（填“能”或“不能”）根據帶標記的目的基因單鏈作探針的核酸分子雜交結果判斷。
II．基因編輯技術（CRISPR/Cas9技術）是一種對靶向基因進行特定DNA修飾的技術，其原理是由一個向導RNA（sgRNA）分子引導Cas9蛋白到一個特定的基因位點進行切割（如圖）。請據圖回答：
（3）從CRISPR/Cas9系統作用示意圖看，能夠行使特異性識別DNA序列并切割特定位點功能的分子是 向導RNA（sgRNA）分子和Cas9蛋白向導RNA（sgRNA）分子和Cas9蛋白。一般來說，在使用基因編輯工具對不同DNA進行編輯時，應使用Cas9和 不同不同（填“相同”或“不同”）的向導RNA進行基因的相關編輯。
（4）CCR5基因是人體的正?；颍渚幋a的細胞膜通道蛋白CCR5是HIV入侵輔助性T淋巴細胞的主要輔助受體之一。科研人員依據 CCR5基因CCR5基因的部分序列設計sgRNA序列，導入骨髓造血干細胞中，構建sgRNA-Cas9復合體，以實現對CCR5基因的定向切割，變異的CCR5蛋白無法裝配到細胞膜上，即可有效阻止HIV侵染新分化生成的 T淋巴細胞T淋巴細胞從而有效減緩病癥。
【答案】（逆轉錄酶）和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）；消毒；吸引農桿菌對受體細胞進行侵染；不能；向導RNA（sgRNA）分子和Cas9蛋白；不同；CCR5基因；T淋巴細胞
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：43引用：1難度：0.6
相似題
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1．學習以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質的功能改變，引發(fā)相關疾病。約有10%～15%的人類基因相關遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價值的基因（如CRISPR-Cas9相關的基因編輯工具）通過一定的方式導入人體靶細胞內，達到替代或修復缺陷基因、治療疾病的目的。導入基因插入位置不當、過高或過低表達，都可能會導致副作用。盡管基因編輯可以實現生理水平的基因表達，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關基因發(fā)生無義突變，產生終止密碼子UAG。研究者構建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設計的sup-tRNA表達載體（產生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導入細胞進行研究，發(fā)現與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進一步利用重組腺相關病毒作為載體將sup-tRNA導入患病小鼠模型中，實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存，實現對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關治療中具有非常大的應用前景。
（1）侵染時，作為載體的重組腺相關病毒與靶細胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內吞，進入細胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細胞的催化合成其互補DNA鏈，再經過過程產生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點繼續(xù)向后翻譯。實驗結果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進無義突變位點的翻譯方面更加有效，支持這一結論的依據是：。
（4）有文獻報道，已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設計獨特的治療策略，這將是一項耗費驚人的項目。據此說明sup-tRNA的應用價值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：27引用：1難度：0.6 -
2．人類基因組計劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，自然界有些植物能產生幾丁質酶催化幾丁質水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入沒有抗性的植物體內，可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結構，導致將其直接導入受體細胞中不能復制和表達。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質酶基因和質粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構建基因表達載體，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5難度：0.7