如圖為“乙肝基因工程疫苗”生產(chǎn)過(guò)程圖解,質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制酶的切割位點(diǎn)。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解培養(yǎng)基中的X-gal,產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì),使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落為白色。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
回答下列問(wèn)題。
(1)過(guò)程①選用限制酶的最佳方案是
B
B
。
A.只有BamHⅠ
B.BamHⅠ和EcoRⅠ
C.EcoRⅤ和BamHⅠ
D.EcoRⅤ和EcoRⅠ
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),一般將目的基因插在啟動(dòng)子和終止子之間。啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行
RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行
。
(3)過(guò)程②需要先將大腸桿菌用 Ca2+
Ca2+
處理,目的是 將大腸桿菌變成感受態(tài)細(xì)胞,處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化
將大腸桿菌變成感受態(tài)細(xì)胞,處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化
。
(4)為了篩選含目的基因表達(dá)載體的大腸桿菌,可在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中額外加入 X-gal
X-gal
,培養(yǎng)一段時(shí)間后挑選出 白色
白色
(填“藍(lán)色”或“白色”)的菌落進(jìn)一步培養(yǎng),從而獲得大量目的菌。
(5)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,常用 抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
技術(shù)檢測(cè)目的基因是否翻譯出乙肝病毒外殼。