Graves病(GD)可導致甲狀腺功能亢進。研究發(fā)現(xiàn),GD患者甲狀腺細胞表面表達大量細胞間黏附分子1(ICAM1),導致甲狀腺腫大??蒲腥藛T通過制備單克隆抗體,對治療GD進行了嘗試。
(1)用ICAM1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠,幾周后取這些免疫小鼠的血清,分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中,多孔培養(yǎng)板中需加入 ICAM1ICAM1以檢測這些小鼠產生的抗體。依據(jù)反應結果,選出抗原—抗體反應最 強強(填“強”或“弱”)的培養(yǎng)孔所對應的小鼠M。
(2)取小鼠M的脾臟細胞制成細胞懸液,與實驗用骨髓瘤細胞進行融合,用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有 無限增殖無限增殖能力的細胞。核酸合成有兩個途徑,物質A可以阻斷其中的全合成途徑(如圖)。正常細胞內含有補救合成途徑所必需的轉化酶和激酶,制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉化酶??捎眉尤際、A、T三種物質的“HAT培養(yǎng)基”篩選出特定的雜交瘤細胞。
融合前將部分培養(yǎng)細胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng),一段時間后培養(yǎng)基中 無無(填“有”或“無”)骨髓瘤細胞生長,說明培養(yǎng)基符合實驗要求。雜交瘤細胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量增殖的原因是 雜交瘤細胞可以進行補救合成途徑雜交瘤細胞可以進行補救合成途徑。
(3)將獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),用ICAM1檢測,從中選擇 大量產生抗ICAM1抗體大量產生抗ICAM1抗體的雜交瘤細胞,將其植入小鼠腹腔中進行克隆培養(yǎng),一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。
【考點】單克隆抗體及其應用.
【答案】ICAM1;強;無限增殖;無;雜交瘤細胞可以進行補救合成途徑;大量產生抗ICAM1抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/9/25 5:0:1組卷:7引用:2難度:0.6
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細胞和正常細胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應單克隆抗體并構建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內,從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結合構建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關抗體-DMI)分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞,檢測細胞活力,結果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
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發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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