酵母菌絮凝是指菌體細胞間通過細胞壁相互粘附、聚集成團的現象。適當提高酵母的絮凝能力，有助于發(fā)酵結束時細胞和產物的分離，可大幅節(jié)約生產成本?？蒲腥藛T研究了R基因對絮凝能力的影響。
（1）啤酒生產中，酵母菌產酒過程的反應式為：C6H12O6酶 2C2H5OH（酒精）+2CO2+能量2C2H5OH（酒精）+2CO2+能量。
（2）科研人員利用基因工程技術獲得R基因被敲除的酵母菌菌株。
①構建含有卡那霉素抗性基因的重組質粒，用LiCI處理酵母菌，使其處于一種能吸收周圍環(huán)境DNA分子的生理狀態(tài)，以實現 重組質粒的導入重組質粒的導入。質粒上的卡那霉素抗性基因通過重組，替換酵母菌的R基因。
②利用含有卡那霉素的培養(yǎng)基獲得單菌落。挑取單菌落，利用PCR技術進行擴增，以確定酵母細胞的R基因是否被成功敲除。若單菌落擴增后的 DNA樣品電泳結果如圖1，則圖2中對應泳道1和泳道2的引物組合分別為 3和4、2和13和4、2和1。（填序號）
（3）科研人員對野生菌株和R基因敲除菌株的酒精發(fā)酵能力和絮凝能力進行了測定，結果如下表。
酶
| 指標 種類 |
酒精發(fā)酵能力 | 絮凝能力 |
| 野生菌株 | 4.5% | 63.06% |
| R基因敲除菌株 | 4.5% | 83.12% |
密閉
密閉
條件和定時排氣。②實驗結果表明，獲得的R基因敲除菌株符合生產需求，依據是
不影響酒精發(fā)酵能力，但絮凝能力提高
不影響酒精發(fā)酵能力，但絮凝能力提高
。（4）科研人員進一步研究R基因影響絮凝能力的作用機制。
①將R基因敲除菌株和野生菌株分別用
無菌
無菌
水進行梯度稀釋。將不同濃度梯度的酵母菌液點樣于含30 μg/mL鈣熒光白（細胞壁組裝抑制劑）并添加了凝固劑 瓊脂
瓊脂
的YPD平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)適當時間后結果如圖3。②綜合上述實驗結果，推測R基因敲除菌株絮凝能力變化的原因是
R基因敲除使菌株的細胞壁組裝能力提高，絮凝能力提高
R基因敲除使菌株的細胞壁組裝能力提高，絮凝能力提高
。（5）若要將R基因敲除菌株應用于工業(yè)生產制作啤酒，請嘗試提出一個還需要進一步研究的問題：
R基因敲除菌株的食用安全性/R基因敲除菌株的遺傳穩(wěn)定性
R基因敲除菌株的食用安全性/R基因敲除菌株的遺傳穩(wěn)定性
。【答案】2C2H5OH（酒精）+2CO2+能量；重組質粒的導入；3和4、2和1；密閉；不影響酒精發(fā)酵能力，但絮凝能力提高；無菌；瓊脂；R基因敲除使菌株的細胞壁組裝能力提高，絮凝能力提高；R基因敲除菌株的食用安全性/R基因敲除菌株的遺傳穩(wěn)定性
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：75引用：3難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7