二倍體作物M有抗蟲、高產(chǎn)等多種優(yōu)良性狀，但不甜。育種工作者通過基因工程將二倍體作物N的高品度基因A（表達(dá)產(chǎn)物是A蛋白）轉(zhuǎn)入了M，獲得了高甜度的M。
（1）用PCR技術(shù)可從N的細(xì)胞中獲得A基因，在設(shè)計PCR引物時，必須依據(jù) 一段已知目的基因一段已知目的基因的特異性核苷酸序列來進(jìn)行，PCR過程每次循環(huán)分為3步，包括變性、復(fù)性和延伸，復(fù)性的結(jié)果是 兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA模板結(jié)合兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA模板結(jié)合。
（2）將A基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的 T-DNAT-DNA中，得到重組質(zhì)粒。進(jìn)行該過程時，DNA連接酶催化生成的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵，A基因的上游還應(yīng)該加上特定的 啟動子啟動子，以便A基因在受體細(xì)胞能正常表達(dá)。
（3）轉(zhuǎn)入了A基因的M細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)，得到了能穩(wěn)定表達(dá)A基因的愈傷組織，則說明A基因已經(jīng)整合到M細(xì)胞 染色體DNA上染色體DNA上。
（4）現(xiàn)已獲得純度高的A蛋白（可微抗原），可通過 單克隆抗體單克隆抗體技術(shù)制備特異性探針，然后利用該探針，檢測轉(zhuǎn)基因植株的A基因是否成功表達(dá)。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；基因工程的操作過程綜合．
【答案】一段已知目的基因；兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA模板結(jié)合；T-DNA；磷酸二酯鍵；啟動子；染色體DNA上；單克隆抗體
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：3難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）。可利用定點(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實(shí)驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7