枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的蛋白酶在醫(yī)藥和化工等領(lǐng)域具有重要的價(jià)值。為篩選蛋白酶產(chǎn)量高的枯草芽孢桿菌菌株，分別將浸過(guò)不同菌株的提收液（a～e）及無(wú)菌水（f）的無(wú)菌圓紙片置于平板培養(yǎng)基表面，在37℃恒溫箱中放置2～3天，結(jié)果如圖所示。請(qǐng)回答問(wèn)題：
（1）在培養(yǎng)包括枯草芽孢桿菌在內(nèi)的異養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分應(yīng)包括水和

無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源

無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源

，配制圖1培養(yǎng)基的基本步驟是計(jì)算→稱量→

熔化

熔化

→滅菌→倒平板。
（2）a～e中蛋白酶產(chǎn)量最高的南株是

a

a

 （用字母回答），判斷依據(jù)是

a周圍的透明圈最大，說(shuō)明其產(chǎn)生的蛋白酶數(shù)量多

a周圍的透明圈最大，說(shuō)明其產(chǎn)生的蛋白酶數(shù)量多

。
（3）分離和純化枯草芽孢桿菌可用稀釋涂布平板法。在進(jìn)行稀釋涂布平板操作時(shí)，要將菌液進(jìn)行一系列的

梯度稀釋

梯度稀釋

，涂布時(shí)，要將涂布器末端浸在盛有體積分?jǐn)?shù)為

70%的酒精

70%的酒精

的燒杯中。
（4）工業(yè)上生產(chǎn)堿性蛋白酶成本高，目前可以采用

固定化酶

固定化酶

技術(shù)多次重復(fù)使用以降低成本。