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在轉基因抗鹽煙草的研究過程中,采用了圖示質粒。其上有SalⅠ,HindⅢ和BamHⅠ三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因,獲得此質粒的農桿菌表現(xiàn)出對兩種抗生素的抗性。
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(1)在構建重組質粒時,選用
HindⅢ
HindⅢ
和SalⅠ兩種限制酶切割目的基因的兩端及質粒,可防止
目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接
目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接
。
(2)用分別含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選農桿菌時,發(fā)現(xiàn)含有目的基因的農桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長,這說明
抗四環(huán)素基因被破壞
抗四環(huán)素基因被破壞
。
(3)采用農桿菌感染煙草細胞是因其體內的重組Ti質粒上的
T-DNA
T-DNA
能將目的基因插入到煙草細胞的染色體DNA上。
(4)用植物組織培養(yǎng)技術培育轉基因抗鹽煙草植株,依據的原理是
植物細胞的全能性
植物細胞的全能性
。
(5)導入抗鹽基因的煙草是否可以表達其遺傳特性,需檢測
抗鹽基因是否轉錄出mRNA,是否翻譯出蛋白質
抗鹽基因是否轉錄出mRNA,是否翻譯出蛋白質
,除上述分子水平檢測外還需進行
個體水平上抗鹽
個體水平上抗鹽
鑒定。

【答案】HindⅢ;目的基因和質粒的自我環(huán)化或反向連接;抗四環(huán)素基因被破壞;T-DNA;植物細胞的全能性;抗鹽基因是否轉錄出mRNA,是否翻譯出蛋白質;個體水平上抗鹽
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/14 7:0:1組卷:2引用:1難度:0.5
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  • 1.目前,科學家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物.下列與之相關的說法,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:5引用:1難度:0.9
  • 2.最近,科學家培育出一種轉基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中.這是繼哺乳動物乳腺生物反應器研發(fā)成功后,在膀胱生物反應器研究上另一進展.
    (1)將人的生長激素基因導入小鼠受體細胞,常用的方法是
     
    .所使用到儀器是
     

    (2)在基因工程中,將目的基因與運載體結合時,必須用
     
    酶和
     
    酶.常用的運載體有
     
    、
     
     
    等,而作為運載體必須具備相應的條件,例如應具有
     
    以便進行篩選.進行基因轉移時,通常要將外源基因轉入動物的
     
    中,原因是
     

    (3)通常采用
     
    技術檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中.
    (4)在研究膀胱生物反應器時,應使外源基因在小鼠的
     
    細胞中特異性表達.
    (5)如果將藥物蛋白基因轉入動物如牛、羊的膀胱上皮細胞中,從轉基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:3引用:1難度:0.3
  • 3.抗凝血酶是一種天然抗凝血劑,在臨床上被廣泛應用。目前科學家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應器中表達出了人的抗凝血酶,如圖是構建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質粒的結構及人抗凝血酶基因所在的DNA片段,回答下列問題:
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    (1)現(xiàn)有以下4種引物,引物A15'-GGACCCCGGG-3';引物B:5'-CATTTCTAGA-3';引物C:5'-CCTGGGGCCC-3';引物D:5'-GTAAAGATCT-3';,利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因,應選用引物
     
    (填引物名稱),擴增產物可選擇限制酶
     
    切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質粒上。
    (2)所選用的pBR質粒上含有啟動子,其作用是
     
    ,將構建的基因表達載體先導入大腸桿菌細胞,然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上,長出了多個大腸桿菌菌落,這些菌落并非都是目的菌株,原因是
     
    。
    (3)將篩選得到的目的菌株提取質粒,再通過
     
    方法導入到豬或羊的
     
    細胞內,通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應器。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:4難度:0.6
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